WIN+55、212-2调节软骨终板细胞基质金属蛋白酶及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1表达及研究.pdfVIP

·中文论著摘要· Wl N55，212-2调节软骨终板细胞基质金属蛋白酶及基 质金属蛋白酶组织抑制因子一1的表达 目 的 椎间盘退变是引起腰痛的常见原因之一，其主要特征包括椎间盘内细胞数量 减少和功能降低，以及蛋白多糖和Ⅱ型胶原等细胞外基质成分减少，而后者是椎 间盘力学特性丧失的直接原因。细胞外基质变性主要是由于基质的合成和分解代 谢失衡，其中基质金属蛋白酶(matrix inhibitolSofmatrix 酶组织抑制因子．1(tissue 极为重要的作用。有效的调控MMPs及TIMP．1有助于维持椎间盘细胞外基质稳态， 延缓和预防椎间盘退变。 大麻素具有广泛的药理活性，其中人工合成大麻素WIN55，212．2已被证实具 有抑制炎性因子，减少蛋白多糖及胶原的降解，保护软骨的作用。然而WIN 55，212．2在椎间盘细胞中的作用尚无研究。因此，本实验探索了WIN55，212．2对 椎间盘软骨终板细胞表达基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制因子．1的影 响，为延缓和治疗椎问盘退变寻求新的治疗靶点。 方法 1、大鼠尾椎软骨终板细胞的分离与培养 采用两步酶消化法分离培养大鼠尾椎椎间盘软骨终板细胞，进行体外培养扩 增。 2、MTT法测定大麻素对软骨终板细胞活力的影响 软骨终板细胞经不同浓度的IL-la(1，2．5，5，10ng／m1)，WIN55，212．2(1，5，10， 20 umoVl)，IL·la(10ng／m1)+WIN 3、real．timeRT-PCR法测定大麻素对软骨终板细胞表达M^佃s及 TIMP．1的影响 软骨终板细胞经不同浓度的儿．1d(10n∥nd)+WIN55,212—2(1，5，10，20 55，212-2 umoVO束U激，在大麻素受体研究中，在加入IL-1a(10删)+wIN 后，real-time 的影响。 · 钴 里 当日 禾 1 1、WIN2．2对软骨终板细胞的活力的影响 55，2 WIN 55，212．2在实验条件下对软骨终板细胞无直接的毒性作用。 2、WIN WIN 的过度表达，增加TIMP．1／MMP．3比值，呈浓度依赖性。 3、选择性大麻素受体拮抗剂抑制WIN 应用选择性大麻素受体拮抗剂AM251及AM630预处理软骨终板细胞，削弱 了WN 55，212．2对MMPs的调节作用。 ◆匕 耋口结论 WIN 55，212．2对延缓椎间盘退变具有潜在的应用价值。 关键词 大麻素受体：椎间盘退变；白介素la；基质金属蛋白酶；基质金属蛋白酶组 织抑制因子．1 2 ·英文论著摘要· WIN12—2 matrix and 55，2 regulate ·‘ ‘1…· 一 ·- -’’ ·· o● tisslleinnibitorolmatrix in endplatechondrocytes Purpose oftheintervertebral acommoncauseoflowback Degeneration