Survivin对乳腺癌预后影响及Endostatin诱导SK-BR-3细胞凋亡观察及研究.pdfVIP

摘 要 第一部分晚期乳腺癌患者外周血中Survivin的表达与预后的相 关性研究 目的： 1．阐明乳腺癌患者外周血与瘤组织中Survivin表达的关系。 2．阐明外周血中Survivin表达与疗效及预后的关系。 有效预测疗效及预后的“标记物群”。 方法： 1． RT-PCR法半定量检测外周血中SurvivinmRNA的表达。 2． Real-timePCR法定量检测外周血中SurvivinmRNA的含量。 3． 免疫组化法半定量检测石蜡切片中Survivin、Her-2蛋白的表达。 4． 分析15例乳腺癌患者的临床因素：年龄、病理类型、临床分期、生存期 及疗效。 根据临床及实验室检测结果进行数据分析及处理。 结果： 与蛋白表达一致。 表达增高。 周血SurvivinmRNA与Her一2、ER／PR的表达可能相关。 结论： 的阳性率一致，并且与ER／PR及Her一2的表达也有一定相关性，有可能 成为预测疗效及预后的“标记物群”： 2．多西紫杉醇联合DDP治疗晚期乳腺癌是一疗效较好的方案，Survivin的 表达与乳腺癌对TP方案化疗的敏感性有一定相关性，且可能关系到患者 的预后： 3．本课题涉及的患者例数较少，实验结果具有一定的参考价值，同时为临 床工作提供一种新方法，尚需进一步大宗病例的纳入来验证本课题的结 论。 关键词：乳腺癌，Survivin，预后 第二部分恩度联合多西紫杉醇对SK_BR一3细胞的抑制作用及相关 机制研究 研究背景： 恩度1M是中国南京先声药业股份公司开发的新型重组人血管内皮抑素 成和肿瘤生长。最近已经有个别研究报告除了抗血管生成活性，内皮抑素还可直 接抑制某些肿瘤细胞系(如结肠癌【11)的生长，我们的前期实验也初步揭示了恩 度可以直接诱导肺癌细胞调亡。但其作用机制的细节目前尚不十分清楚。 目的： 1 观察恩度与多西紫杉醇对乳腺癌细胞的生长抑制作用，探讨恩度是否能够诱 导乳腺癌细胞凋亡及相关的凋亡信号通路。 2 观察恩度与多西紫杉醇的联合是否具有协同作用，如果有，则进一步探讨联 合用药的时间、剂量关系及可能的相关机制，指导临床联合用药。 方法： 1 MTT测定药物对SK-BR-3细胞的抑制率； 2 流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期； 3 ELISA检测凋亡相关蛋白的表达。 结果： 恩度对乳腺癌SK-BR．3细胞的抑制作用具有明显的时间依赖性，与剂量无 明显关系，恩度1ll g／ml作用72h的抑制率为30．1％，凋亡率为11．62％，细胞 n 1．t 周期无明显改变：sFas／sFasL均未见表达。恩度1g／ml作用72h可见Bcl．2的 2．530．40)。 下调(16．64％VS10．32％)而Bax的表达无明显改变(2．65％vs 多西紫杉醇对乳腺癌SK．BR．3细胞的抑制作用具有明显的时间和剂量依赖 1．L 21．1 性，多西紫杉醇作用SK-BR一3细胞24h的IC50为2．09 g／ml g／ml作用24h p ％)。sFas／sFasL亦未见表达，多西紫杉醇2 g／ml作用72h亦可见Bcl．2的下调 (16．64％％VSl2．71％)而Bax的表达轻微升高(2．65％VS3．24％)。 多西紫杉醇与恩度同时给药方案表现出明显的协同作用，而序贯给药的抑制 率较多西紫杉醇单药无明显升高，二者同时给药诱导凋亡的