离子注入选育高效利用木糖生产L(%2b)-乳酸米根霉.pdf

摘 要 摘要 L(+)-,h酸(LA)是一种多用途的精细化学用品，广泛用于食品及医药领域。 利用L(+)一乳酸聚合生产生物可降解塑料，性能优良、环境友好，作为目前广泛应 用的石油基塑料的替代品，具有巨大发展潜力。然而，L(+)-*L酸的生产成本是制 约聚乳酸生物材料广泛应用的瓶颈。 廉价原材料的高效利用是降低U+)一乳酸成本的一个关键因素，广泛存在的纤 维类物质是自然界最廉价的原材料。纤维类物质高效利用的关键在于纤维类物质的 水解以及水解产物中木糖的利用，本文针对离子束修饰米根霉提高木糖的利用率发 酵生产L(+),L酸进行研究。 本论文对出发菌株米根霉RLC41-6利用木糖生产L(+)-*L酸的发酵工艺进行优 3，无 化和代谢通量分析。初步确定其发酵条件(g仰：木糖50，氮源(NI-h)zS04 60， 机盐ZaS04·7H200．15，KH2P04 O．75，中和剂CaC03 0．5，MgS04·7H20 接种量5％，装液量20％。代谢通量分析结果表明，丙酮酸节点为关键节点。 采用离子注入技术选育高效利用木糖生产L(+)一乳酸的米根霉。确定了合适的 1015_1．56X1015i0玎s，cIn2，经过多轮离子 矿离子诱变参数：能量10keV、剂量1．04X 注入处理，筛选到高效利用木糖生产L(+)-*L酸的菌株RQ4012，并对该菌连续传 代培养，表明具有较好的遗传稳定性。 对诱变菌株RQ4012含木糖底物发酵工艺进行研究。在以木糖为唯一底物时， RQ4012发酵最佳条件：木糖10％，生理盐水浸泡孢子9h．(NI-h)2S0439／L，接种 量4％， 中和剂CaC036％，装液量20％，温度37℃，转速200r／rain。在进 行葡萄糖木糖混合糖发酵时，菌株优先利用葡萄糖，当葡萄糖耗尽时，再加速利用 木糖进行菌体的二次生长和产酸。 关键词：米根霉离子注入木糖利用代谢通量分析L(+)一乳酸发酵 acid L(+)一lactichigh Rhizopusoryzae Breeding productive from ions xyloseby implantation Abstract Yang Yingge(Major：Bio—Phiscs) DirectedProf．Yu by Zengliang acidassubtlechemicalswithlotsofuSesis usedinfood L(+)一lactic beingwidely and industries．Lacticacidcanbeformed is pharmaceutical polylacticacid口LA)，which new withexcellent andbe toenvironment, biodegrableplastic．PLA capabilityfriendly hastremendous costof acidrestrictstheextens