Arabidopsis OBG-Like GTPase （AtOBGL）Is Localized in Chloroplasts and Has an Essential Function in Embryo Development.pdfVIP

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2017-09-02 发布于湖北
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Arabidopsis OBG-Like GTPase （AtOBGL）Is Localized in Chloroplasts and Has an Essential Function in Embryo Development.pdf

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Arabidopsis OBG-Like GTPase （AtOBGL）Is Localized in Chloroplasts and Has an Essential Function in Embryo Development.pdf

Chigrieta1．·AtOBGLIsaChl。r。plaSt。calizedGTPase。ftheOBGFamilyl1381 Ras—likeGTPaseSarlPwasreplacedinchloroplastsbythepro— InWtroTranscription／TranslationofVariousConstructs karyotic—type OBG—likeGTPaseAtOBGL．Nevertheless，these— Forinvitrotranscription／translation，thefuII—lengthcodingse— verephenotypeoftheatobglmutantrathersuggestsarole quencewasclonedintopSP65．Radio—labeledproteinwaspro— oftheproteininachIoroplastfunctionthatgoeswelIbeyond ducedusingtheTNTSP6CoupledReticuIocyteLysateSystem vesicletransport．OBG—likeproteinsinbacteriahavebeenimpli- from Promega—Deutschland (Mannheim， Germany) for cated in processessuch asDNA partitioning andribosome 9Omin at 30。C in the presence of S-labeled methionine stability(Slominskaeta1．，2002；Taneta1．，2002)andingeneral (1175Cimmor。)．Thetranslationmixturewassubsequently termstoreguIatethecellcycle．Asim ．1arfunctionofAtOBGLin centrifugedfor20 minat50000gtoremoveaggregatedpro— chloroplastswouldcertainlyaccountfortheIethalphenotype teinsandthesupernatantwasused intheimportreaction． observed in homozygous mutant plants．Furtherstudies， preferablyby useofRNAi—induced gene silencing，willbe ProteinlrnportintoChloroplasts requiredtoshedIightonthespecificfunctionofAtOBGLin Impor土competentchIoroplastswere isolatedfr0m leavesof plants． 1O一12一day—oldpeas(P umsativ