从下丘脑弓状核ERα探讨胎肾细胞悬液对骨代谢的调控机制.pdfVIP

陕西中医 2009年第 3O卷第 12期 1671 从下丘脑 弓状核 ERa探讨胎肾细胞悬液对骨代谢的调控机制 笪晨星 郑清莲△ 王字强▲ 武警陕西总队第一支队卫生队(西安710021) 摘 要 目的：从 下丘脑 ER—d探讨胎 肾细胞悬液对骨代谢的调控作用。方法：取 3月龄未交配健 康 SD雌性大鼠8O只，随机分为 4组 ，即A、B、C、D组 。A组行假手术 ，B、C、D组行 oVX 手术。术后 8周，A、B组给予生理盐水，C组给 予苯 甲酸雌二醇，D组给予胎 肾细胞悬液。 药物治疗 4周后 ，①通过观察骨组织形态学判断骨代谢发生的变化 ；②利用免疫组织化 学观测ER—a在下丘脑 弓状核的表达 ；③放免法检测血清雌二醇、生长素水平。结果 ：与A 组比较，B组大鼠骨小梁稀疏，排列紊乱，骨小梁间隙明显增大，ER—表达及血清E 、GH 水平明显下降(P0．01)；与B组相比，C、D组 E2水平显著增 高(P0．01)，ER—a表达 及血清GH水平 亦随之上升 (P0．05)，C组与 D组比较 ，ER—a表达及血清激素水平无 显著差异 (P0．05)。结论：肾虚骨质疏松症的病理机制为 肾精不足 ，骨髓 ，脑髓失养，表 现在下丘脑一垂体一生长激素轴的调控失常，胎 肾细胞悬液具有类激素样作用，可能通过 神经内分泌代谢 系统调节骨代谢 。 主题词 骨病 ／病理 骨代谢 大鼠 实验研究 @胎 肾细胞悬液 胎 肾属于动物类补肾中药 ，前期从骨转化生化方面 ，骨形 盒均购 白天津九鼎医学生物工程有限公司 ，ERa多克 隆抗体一 态计量学 ，骨密度 ，骨矿含量和骨生物力学等角度研究 了胎 肾 抗 ，二抗 ，SP免疫组化染色试剂盒 ，DAB显色试剂盒等购 自武 细胞悬液防治绝经后骨质疏松 的机理机制El,z]。中医理论认为， 汉博士德生物工程有限公司 。 。肾主骨、髓藏骨 中、脑为髓之海 ，故 日肾主骨、生髓 、通脑 。这一 1．4 实验方法 1．4．1 造模 ：参照文献 ]：8O只大 鼠随 点与现代医学对于骨质疏松 (OP)的认识一致 ，即不仅把它看 机分为 2组，其 中一组 18只为假手术组 (A)，另一组 62只为 作是骨代谢 的改变 ，而是全身老年性改变 ，特别是 内分泌，代谢 造模组 。各组大 鼠均 以 1O 的水合氯醛溶液 ，按 0．3mL／kg大 系统 的衰老在骨骼系统 的反映。目前关于 OP的研究 已深入分 鼠体重腹腔注射麻醉后 ，取仰卧位 ，腹部手术区 (大腿根部到最 子水平 ，但是下丘脑神经 内分泌系统在 OP发病机制 中的作 后一肋之 间)常规消毒。在腹中线末肋下约 1．5cm～2cm，做一 用 ，国内文献鲜有报导 。基于这一 中医理论并在前期研究的基 个长约 2．5cm～3cm 的纵形皮肤切 口。分离皮下组织 ，剪开腹 础上 ，本实验采用去势大 鼠骨质疏松 的经典模型，以胎 肾细胞 直肌长约 lcm切 口，慢慢拉 出一侧子宫角，向上约 3cm～4cm 悬液为试剂 ，研究补 肾药对骨代谢 的影响与下丘脑雌激素受 可见一乳 白色发亮 的脂肪 团，用无齿镊将脂肪 团轻轻夹 出切 体、生长激素水平之间的关系，是探讨 “肾主骨 ”理论 的神经 内 口，在脂肪 团中找到一绿豆大小、菜花状粉红色的卵巢以及紧 分泌代谢 网络可行而有效的途径 。 密相连的子宫角，用止血钳夹住卵巢 ，在子宫角上部及下部的 1 材料和方法 t．1 实验动物与分组 3月龄未交配 输卵管做两个结扎，将卵巢摘除 ，并予 以红霉素软膏适量伤 口 健康 SD雌性大 鼠8o只，体重 (200~220)g，孕 19～21dSD大 外擦 。并肌注青霉素钠 2o万 ／只／d，连用 3d，以预防伤 口感 鼠 10只，普通级 ；标准大 鼠饲料 (均 由西安交通大学医学院动 染 。 物中心提供)。所有实验动物饲养条件一致，SD大 鼠取得屏障