灵芝多糖诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的研究.pdfVIP

2009年12月第16卷第23期 论 著 灵芝多糖诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的研究 徐 晋 ，吴 丽 ．徐巧芳 (江苏省第二中医院外科 ，江苏南京 210017) 摘【要】目的：研究灵芝多糖 (GLPS)与化疗药氟尿嘧啶联合使用诱导人肝癌细胞 HepG2凋亡作用 。方法：MTF法测 定细胞毒作用 ，流式细胞术检测细胞凋亡率 ，比色法测定 Caspase一3、Caspase一8酶活性 ，Western—Blotting法检测细 胞色素 C、Caspase一3、Caspase一8蛋 白表达情况 。结果 ：灵芝多糖与氟尿嘧啶联合使用具有显著的细胞毒作用 ；流式 细胞术检测 ，随着 GLPS浓度增加 ，细胞凋亡率升高 ，Caspase一3、Caspase一8酶活性亦增强 ；Western—Blotting检测 发现GLPS作用后细胞色素 C、Caspase一3、Caspase一8蛋 白表达不同程度增加 。结论 ：灵芝多糖与氟尿嘧啶联合使用 可通过引起细胞色素 C的释放 ，活化 Caspase诱导肝癌细胞凋亡。 关【键词1灵芝多糖 ；肝癌 ；凋亡 ；Caspase；细胞色素 c 中【图分类号】R979．1 文【献标识码】A 文【章编号】1674—4721(2009)12(a)一007—03 Research abouttheapoptosisoflivercancerHepG2cellsinducedbyGano- dermalucidum p0lysaccharides XUJin． Li,XUQiaofang A【bstract】Objective：ToevaluatetheapoptosisofGanodermalucidumpolysaccharides(GLPS)combinewith5-fluorouracil (5-FU)inHepG2cellsM．ethods：MTrwasappliedtoanalyzethecytotoxicitywithdifferentconcentrationinHepG2cells， theflow c~ometficanalysiswasperformedtodetectapoptosis．Caspase一3relativeactivitywasdetemr inedbycolorimetric assayandexpressionofCytochromeC．Caspase一3andCaspase一8proteinswasdetectedbyWestern—Blotting．Results：GLPS combined with 5-FU wassignificantin HepG2 cells．GLPS treatmentresulted in aconcentration dependentincreasein apoptosisratiodetectedbyfluorescenceactivatedcellsorter，andactivityofCaspase一3andCaspase一8wereincreased，too． MeanwhileexpressionofCytochromeC、Caspase一3andCaspase-8proteinsraisedaswel1．Conclusion：GLPScombinewith 5-FU caninduceapoptosisinHepG2cellsthroughinducingreleaseofCytochromeCthenactiveCaspasepassway． K【eywords】Ganodermalucidumpolysaccharides；Livercancer；Apoptosis；Caspase；CytochromeC 20世纪 70年代 以来 ，国内外一系列研究证明传统中药灵 糖与常规化疗药物 (氟尿嘧啶)联合使用对人肝癌细胞HepG2 芝 (Ganodemralucidum