核糖体大亚基蛋白L11环状区loop62在调控蛋白质翻译中作用.pdfVIP

摘要 摘要 在蛋白质翻译的过程中，能量产生于GTP水解成GDP并释放无机Pi的过 程。核糖体上存在一个GTPase．associated 活参与蛋白质翻译的GTP酶(translational rRNA上的safcin．ticin 性。GAC由三个重要的组件组成：23S loop(SRL)，L10和 L7／L12蛋白组成的stalk，23SrRNA的helix 蛋白。L7／L12和Lll的蛋白序列在原核生物中是高度保守的。 L7／L12 stall(位于核糖体大亚基上，它由L10，L11和多拷贝的L7／L12组成。 rRNA L7／L12在大肠杆菌中是4个拷贝数，它的N端结构域(NTD)锚定在23S 上，并结合着L10。它的CTD伸展在核糖体的外面，招募trGTPase。 L1l蛋白由NTD和CTD组成，它的CTD结合在23SrRNA的H43／H44上， C端结构域(CTD)与NTD之间是一段柔性环状结构，它的NTD结构比较松散， 可以在核糖体上来回摆动。trGTPase结合到核糖体上引起L11构象的改变，使得 L1 酶活性，L11通过构象的改变像分子开关一样控制与L7／L12的相互作用，从而 调节trGTPase的功能。 1-NTD 本文主要研究L1 loop62对GTP水解的影响以及在核糖体翻译过程中 能非常重要，在空间位置上和L12．CTD靠的很近，它是Lll与L12相互作用的 R(精氨酸)。这几个氨基酸高度保守，尤其是天冬氨酸。我们对100p62位做了 点突变，把酪氨酸、天冬氨酸和精氨酸分别突变成丙氨酸，把氨基酸的侧链突变 掉，发现突变体重构的核糖体降低了GTP酶的GTP水解活性，同时体外翻译实 验表明核糖体的体外翻译能力也下降了。Loop62～个氨基酸的微小变化影响了 核糖体的功能，说明loop62在核糖体依赖性的GTP水解和蛋白质的翻译中都有 一定的调控作用。 L7／L12Lll 关键词：蛋白质翻译GAC GTP水解 5 Abstract Abstract the of is inthe of processproteintranslation，theenergy During generatedprocess GTP intoGDPandrelease Pi．ThereisaGTPase-associated hydrolysis inorganic theribosome．GACis for the center(GAC)in responsible hydrolysis stimulating ofGTPase inthe of translation．ItconsisBthree activity participating importantparts： thesarcin-ricin 23S L10andthestall(ofL7／L