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中 文 摘要
本研究将扩增得到的PCV2
ORF2基因连接到PPVSC.1株VP2基因的N端,将
质粒免疫健康小鼠,分别设立5个对照组:pCI.ORF2.VP2组、细小病毒灭活疫苗组、
圆环病毒亚单位疫苗组、PCI—neo空载体组、空白对照组。通过脾细胞增殖法、流式细
鼠实质器官染色体基因进行PCR扩增,对核酸疫苗的安全性进行检测。
到大量绿色荧光,说明它在PKl5细胞中能正常表达。重组质粒免疫小鼠后,其脾脏细
胞增值活性和CD4+、CDS+T淋巴在外周血淋巴细胞中的比率均有一定程度的升高,均
特异性抗体,整体水平高于pCI.ORF2.VP2组、细小病毒灭活疫苗组和圆环病毒亚单位
疫苗组。提取小鼠各组织器官染色体基因组进行PCR扩增,对基因疫苗的安全性进行
检测,结果显示未能从免疫小鼠各组织的基因组扩增出ORF2基因和VP2基因片,说明
核酸疫苗是安全的。
通过以上可以看出:重组几.15以后,核酸疫苗无论是在细胞免疫水平方面还是产
生特异性抗体水平方面都有较大程度的提高,因此将IL.15克隆进真核表达质粒中是提
高核酸疫苗免疫活性的一条有效途径。这为IL.15乃至其他细胞因子作为核酸疫苗免疫
佐剂研究提供了参考,也为进一步研制新型、高效的PPV、PCV2疫苗奠定了基础。
关键词:猪细小病毒:猪圆环病毒;VP2基因;ORF2基因;白介素15;核酸疫苗
Influenceof ofRecombinantPorcineIL一15
Immunogenicity
thePPVVP2-PCV2ORF2nucleicacidvaccine
against
FeiyuXiong(PreventiveVeterinaryMedcine)
Directed Guo
Prof.Wanzhu
by
(Sichuan
Agriculture 14)
Abstract
Inthis ORF2 wasConnectedtotheN of
experiment,theamplifiedgene terminus
strain it
VP2(PPV thencloneintothe vector
SC一1)gene,and eukaryoticexpressionpCI—neo
to
constructthe this the
eukaryoticexpression basis,construct
plasmidspCI-ORF2-VP2.On
recombinant 5-ORF2-VP2the IL·15 intothe
plasmidspCI—ILl bycloningporcine gene
itintoPK15 the and
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