gc-ms法测定氙气液气分配系数的方法学研究最新修订版.docVIP

GC-MS法测定氙气/气分配系数的方法学研究 1．四川大学华西医院麻醉学与危重医学研究室（成都，610041） 2．四川大学华西药学院药物分析教研室（成都，610041） 张文胜1 曹 伟2 李章万2 罗南富1 刘 进1 目的：不适合用常规的吸入方法给药。如果能够找到一种对氙气有足够大的分配系数的静脉载体，将氙气溶解后改为静脉给药，降低麻醉成本，使这种理想麻醉气体的使用成为可能。本实验利用气质联机（GC-MS）氙气分配系数，为氙气的药剂学研究提供实验。 方法：试剂美国Agilent公司HP-6890气相色谱仪及5973N型质谱仪；高纯氙气30 % IntraLipid?。（2）色谱条件HP – 5毛细管色谱柱，柱温40 ℃，进样口温度120 ℃，分流进样，进样量50 ul，载气He质谱条件为电离方式EI，电子能量70 eV选择离子检测129 m/z132 m/z。分配系数的采用注射器-注射器二次平衡顶空法测定37 ℃氙气在30 % IntraLipid?。线性关系考察进样精密度试验日内和日间精密度考察检测限方法学验证 结果： 37 ℃时氙气在30 % IntraLipid?中的分配系数0.085 ± 0.003、1.657 ± 0.063和0.630 ± 0.019（见表线性关系考察用校正过真实容积的注射器取高纯氙气10 ml，以倍比稀释法用空气精确稀释到浓度为 3.125 %、1.5625 %、0.7812 %、0.3906 %、0.1953 %、0.0977 %、0.0488 %和0.0122 %，用微量进样针精确吸取50 ul注入气相色谱仪，每个浓度连续测定三次，以浓度为横坐标，以平均峰面积为纵坐标进行线性回归回归方程：Y = 1E+8X + 2E+3，r2 = 0.9999结果表明，氙气在3.125 % - 0.0122 %浓度范围内线性关系良好见图1。进样精密度试验分别配置浓度大约为1.5 %和0.02 %的氙气样品，精确取50 ul注入气相色谱仪，每个浓度连续测定五次，结果其峰面积RSD值分别为1.%和2.%，表明该方法进样精密度良好见表。 日内和日间精密度考察在同一天内的测定五个样品，并在接下来的四天里每天测定一次，计算分配系数及其RSD值。日内和日间精密度分别为.1 %和.8 %（见表。 检测限取纯氙气适量，用空气逐级稀释，精密取50 ul进样，按信号噪声比3:1计算，氙气的最低检测限为2 ppm。 讨论：本实验方法的建立参照《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则》进行，由于样品和对照品均由高纯氙气经稀释而成，故省去了加样回收实验。氙的主要同位素的自然丰度为别为：129Xe（26.44 %）、131Xe（21.18 %）、132Xe（26.89 %）、134Xe（10.44 %）和136Xe（8.87 %），因此，在本方法中选择了丰度最大的129Xe和132Xe进行定量检测。氙气在HP-5毛细管色谱柱中是不保留物质，该方法类似于快速流动注射分析，保留时间仅为1.17 min，大大提高了分析速度。但由于采用的是手动进样，再加上使用了分流模式，这都对进样技术提出了更高的要求，所以本方法在进行测定时均为连续三次进样取平均值。 从测定的结果来看，该分配系数测定方法完全能够满足《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则》中对分析方法建立和确证的要求，因此可作为氙气在液体中分配系数测定的常规方法。氙气分配系数GC-MS 表 37 ℃时氙气在30 %IntraLipid?中的分配系数 ±s υ RSD 纯 水 0.08± 0.003 6 3.5 % 大豆油 1.6± 0.063 6 3.9 % 30 % IntraLipid? 0.630 ± 0.019 6 3.0 % 表 进样精密度实验 峰面积1 峰面积2 峰面积3 峰面积4 峰面积5 均 RSD 1.5 % 1356603 1361376 1406540 1386958 1357789 1373853 1.6 % 0.02 % 431137 433970 440190 415534 418128 427792 2.5 % 表 日内和日间精密度实验 　 分配系数1 分配系数2 分配系数3 分配系数4 分配系数5 均RSD 日内 0.618 0.638 0.590 0.599 0.620 0.613 .1 % 日间 0.630 0.621 0.628 0.583 0.567 0.606 .8 % 图1氙气浓度标准曲线 第 1 页 / 共 2 页