百合口服液遗传毒性的评价与分析.pdfVIP

· 42O · 甘肃医药2009年 l2月第 28卷燕 6期 GansuMedicalJournal。Dec2009． i 垦 · 基础研究 · 百合口服液遗传毒性的评价与分析 张永东 梁涛 李永辉 郭红云 刘英 摘【要】 目的：采用生物检测技术评价百合口服液是否有遗传毒性，为其食用安全性提供依据。方法：依据国标进行Ames 试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验。结果：Ames试验为阴性，经口给予该受试物2．5g／lg【一10．Og／lcg对 小鼠体细胞及雄性生殖细胞无诱变性。结论：百合口服液作为保健食品未见遗传毒性。 【关键词】 百合；遗传毒性；Ames试验 中围分类号：R99~．4 文献标识码：A 文章编号：1004—2725(2009)06—42O—o2 百合是甘肃特有的农产品，甘肃产百合含有丰富的蛋白质、 1．2．1 Ames试验 l【_2J。采用标准测试菌株TA97、TA98、TA100 磷、钾、钙、粗纤维、蔗糖等多种微量元素和维生素，具有止咳化 和TA102在加和不加S一9混合液的条件下，将样品5个剂量 痰、润肺养颜、滋阴活血、清心安神之功效，百合口服液主要有百 5000、2500、1000、500及 10og／皿采用平板掺人法进行试验，同 合、蕨麻、香菇、枸杞、大枣、蜂蜜等加工而成，具有增加体质、抗 时设自发回变对照组、溶剂对照组及阳性对照组。阳性对照为 疲劳、调节免疫等功能。百合口服液做为一种保健食品，为其食 敌克松(DexonS0ta~,／皿)、甲基磺酸甲酯(MMSIg／皿)、2一氨 用安全性提供毒理学资料，我们采用了3项遗传毒性试验指标， 基芴 (2一AF10~g／皿)、1，8一二羟基葸醌 (1，8一D~ ogs／ 对其遗传毒理学效应进行研究。 皿)。每剂量平行做3皿，试验重复一次。 1．2．2 小鼠骨髓微核试验。将6o只小鼠随机分为阴性对照 1 材料和方法 组、阳性对照组(环磷酰胺40mg／kg，ip)、样品四个剂量组 (2．5、 1．1 材料 5．0、7．5、10．0g／ks)；每组雌雄各5只，各组均用30h两次灌胃 1．1．1．实验动物。昆明种小鼠，清洁级 ，体重25～35g，甘肃省 法，每次灌胃容积为0．2ml／10g，第2次灌胃后6h处死动物；取 医学科学研究院实验动物研究中心提供，实验动物生产许可证 股骨骨髓悬于小牛血清中直接涂片、甲醇固定，Ciemsa应用液 号：SYXK[甘]2OO6—0010号。实验室环境，温度：20—22％， 染色 ，pH6．8磷酸缓冲液，冲洗，油镜下计数。每鼠计数lOOO个 相对湿度：45％-55％。 嗜多染红细胞的微核细胞数，计算微核发生率。 1．1．2 样品。百合口服液，棕色液体，由兰州百合实业发展有 1．2．3 小鼠精子畸形试验。将25只雌性小鼠随机分为样品3 限公司提供，试验时用蒸馏水配制成所需浓度。 个剂量组(2．5、5．0、10．or／kg)、阴性对照组、阳性对照组(环磷 1．1．3 试剂及配制。环磷酰胺 (CP)江苏恒瑞医药股份有限公 酰胺40mg／kg，ip)，每组5只。各组动物每天灌胃一次，每次灌 司生产，批临用前用生理盐水稀释40mg／kg；Ciem． 胃容积为0．2ml／10g体重，连续5d。于首次给样品后的第 35d 强应用液；2％的伊红染液；pH6．8磷酸缓冲液。 处死动物，取双侧附睾放人生理盐水中纵向切 1—2刀，过滤，吸 1．1．4 生物材料。TA97、TA98、TA100和TA102等4个菌株由 滤液涂片、甲醇固定、2％伊红染色制片。每只鼠镜检 1000个 美国Ames实验室馈赠，S一9混合液由甘肃省医学科学研究院 精子，计数精子畸形数及畸形类型，并计算畸形率。 药理毒理实验 中心制各、敌克松 (Dexon)、甲基磺酸 甲酯 1．3 统计学方法 计量数量采用i4-s表示，使用SPSS1