龙眼壳多糖分离提取及其活性初步与研究.pdf

龙眼壳多糖的分离提取及j际旨性初步研究 龙眼壳多糖的分离提取及活性初步研究 摘要 目的：从龙眼干果壳中分离、提取龙眼壳多糖，对』￡进行仞步化学分析 和初步的免疫活性及抗肿瘤活性研究。 方法：通过正交实验来确定龙眼壳多糖最适的提取方法，并以此方法从 中提取龙眼壳多糖；借助Sevage法．酶法和H：02脱色素法分别对龙眼壳多 糖脱蛋白和脱色素；多糖含量用硫酸．苯酚法进行测定；使用DEAE一纤维素 柱层析和丙烯葡聚糖凝胶色谱S-300柱层析对龙眼壳多糖进行分级纯化。采 用柱色谱、醋酸薄膜纤维电泳和比旋光度法检测龙眼壳多糖的纯度：通过 凝胶色谱法测定龙眼壳多糖的分子量；通过三氟乙酸完全酸水解法测定龙 眼壳多糖的单糖的成分。 在体外免疫活性的实验中，用MTT法测定龙眼壳多糖已除蛋白样品 胞活性的作用。 在体内免疫活性的实验中，通过灌胃给药方式，MTT测定LPl．2A和 LPl．2B对小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增 2 2007级硕d：Of究生论文 龙眼壳多糖的分离提取及』E活性初步研究 LPl．2B对NK细胞活性的作用。 胞Bel．7404、SKV03、MCF一7的抑制作用。 在体内抗肿瘤实验中，腹腔接种S180腹水瘤细胞，小鼠灌胃给药 LPl．2A和LPl．2B，计算小鼠的生命延长率。 结果：龙眼壳多糖的最适热水浸提条件为浸提温度为90℃，浸提时间为 3．5h，料液比为1：30，浸提：欠数为3次。在此条件下提取出的龙眼壳粗多糖 的得率为1．31％，其中龙眼壳粗多糖的多糖含量为27．33％。龙眼壳多糖己除 型端基吡哺葡萄糖。完全酸水解后的龙眼壳多糖的单糖成分为葡萄糖。 鼠脾淋巴细胞增殖作用和体外协同ConA促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖作用 加。体外直接作用对小鼠脾淋巴细胞分泌IL．2影响和体外对ConA诱导的小 巴细胞分泌IL．2的量随着其浓度的增加而增加。体外对正常小鼠脾脏NK细 度的增加而增强。 淋巴细胞增殖作用和体内协同ConA促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖作用实验 内直接作用对小鼠脾淋巴细胞分泌IL．2影响和体内对ConA诱导的小鼠脾淋 细胞分泌IL．2的量随着剂量的增加而增加。体内对正常小鼠脾脏NK细胞活 加而增强。 二l 2007级硕卜研究生论文 龙眼壳多糖的分离提取及其活性初步研究 癌细胞MCF．7的生长抑制率随着浓度的增加逐渐增加。 率分别为74．47％和32．98％。 结论：龙眼壳多糖己除蛋白样品(LPl．2A)是a—D．型端基吡喃葡萄糖，其 生存时间有一定的延长作用。 关键词龙眼壳多糖，分子量，单糖成分，免疫活性，抗肿瘤活性 4 2007级硕I：研究生论文 龙眼壳多糖的分离提取及jE活性初步研究 Extraction of shell p01ysaccharideslonganand research preliminaryactivity ABSTRACT extractand from shell Objective：To purifypolysaccharideslongan for chemicaland immune andanti·tumor analysispreliminaryactivity activity． tOdeterminethe