黄孢原毛平革菌合成的木质素过氧化物酶, 锰过氧化物酶及其菌球在染料脱色过程中的作用.pdfVIP

第2 卷 第3 期 过 程 工 程 学 报 Vol.2 No.3 2002 年 6 月 The Chinese Journal of Process Engineering June 2002 黄孢原毛平革菌合成的木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶 及其菌球在染料脱色过程中的作用 章燕芳， 李华钟， 华兆哲， 陈 坚 (江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214036) 摘 要：在黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosp orium) 限氮浸没式培养中，获得了含木质素过 氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP) 、只含LiP 或MnP 以及无LiP 和MnP 的4 种培养物，考察了 LiP ，MnP 及菌球在染料脱色过程中的作用. 结果表明，4 种培养物对6 种染料都有明显的脱色效 果，甲基橙、橙I 、次甲基蓝脱色率在90%左右，刚果红、直接湖蓝脱色率在80%左右，结晶紫脱 色率在 60%左右. 无酶情况下染料的脱色主要是菌球的吸附，有酶情况下染料的脱色主要是酶的 降解. 菌球在脱色过程中除了吸附染料外，还起到提供H2O2 和藜芦醇的作用，促进了染料的降解. 关键词：黄孢原毛平革菌；木质素过氧化物酶；锰过氧化物酶；菌球；染料；脱色 中图分类号：X703 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2002)03−0246−06 1 前 言 黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysospor ium)在一些主要营养物(氮、碳、硫)受到限制时形成 的木质素降解酶系对各种异生物质具有独特的降解能力[1, 2]. 广泛研究表明，该菌可以降解多种染 料[3] ，包括偶氮类、三苯甲烷类、杂环类、聚合染料等，在染料废水处理方面具有广泛的应用前 景[4, 5] . 降解酶系中起主要作用的有两种酶：木质素过氧化物酶(Lignin Peroxidase，LiP)和锰过氧化 物酶(Manganese Peroxidase，MnP). 它们合成后被分泌到胞外，经H2O2 启动一系列自由基链反应， 依靠氧化还原反应降解各种染料. Pasti[6]分别测定了P . Chrysosporium 产生的LiP 和MnP 对22 种 偶氮染料的氧化速率. Cripps[7]证实菌球在染料脱色中也起到重要作用. 本文考察了黄孢原毛平革 菌合成的木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶及其菌球在染料脱色过程中的作用. 2 材料与方法 2.1 菌种及培养条件 菌种：黄孢原毛平革菌WX213 ，由江南大学生物工程学院微生物实验室提供. 基本培养基(g/L)[8] ：葡萄糖 10，酒石酸铵0.2 ，苯甲醇0.54，MgSO 0.71 ，吐温80 1，KH PO 4 2 4 2.56 ，VB1 0.001 ，邻苯二甲酸缓冲液10 mmol ，微量元素液70 ml ，调节pH 为4.5. 微量元素液(g/L) ：氨基乙酸0.6 ，MnSO ⋅H O 0.5，NaCl 1 ，FeSO ⋅7H O 0.1，CoSO ⋅7H O 0.22 ， 4 2 4 2 4 2 CaCl ⋅2H O 1.56 ，ZnSO ⋅7H O 0.1 ，CuSO ⋅5H O 0.1 ，AlK(SO ) ⋅12H O 0.01 ，HBO 0.0 1 ， 2 2 4 2 4 2 4 2 2 3 Na MoO ⋅2H O 0.01. 2 4 2 6