柑橘木虱病原微生物资源的调查.docVIP

柑橘木虱病原微生物资源的调查 福建农业科学院柑橘黄龙病研究中心 (2010年03月18日) 一、介绍 柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayana)属同翅目木虱科。它不仅是柑橘产区的重要新梢害虫之一，而且是柑橘黄龙病的主要传播媒介。控制柑橘木虱是柑橘黄龙病综合防治最重要的技术措施。微生物是进行害虫生物防治的重要资源。谢佩华等(1988)从柑橘木虱的多种寄生菌中，分离出致性较强的蜡蚧头孢菌(Cephalosphorium lecanii Zimm)。室内试验与温室试验表明，该菌在湿度较高的情况下，对木虱成虫、若虫的致病率可达80-100%(谢佩华等，1988)。Avery等(2009)研究了柑橘木虱寄生真菌-玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)在温室与田间条件下对柑橘木虱的防治效果，以及柑橘木虱成虫对该菌的自动传播作用。但总的说来，人们对柑橘木虱寄生菌资源的调查与研究都是很有限的。此计划拟从罹病虫体、寄主植物叶面附生微生物和内生菌，以及土壤中分离柑橘木虱的寄生菌，为应用微生物防治木虱提供菌源。 二、目标 　　获得防治柑橘木虱的虫生真菌或其它微生物 三、方法 1 柑橘木虱病原菌田间发生情况调查与采集 2010年04月至2011年03月，在福州宦溪柑橘园，定点调查柑橘木虱在常规管理与无病虫害管理条件下的田间种群增长与天敌微生物发生情况，了解天敌微生物的自然控制作用。采集木虱罹病虫体、柑橘茎叶及根际土壤，供分离木虱病原菌用。 2 柑橘木虱饲养与繁殖 2010年3月至5月，利用柑橘和九里香扦插苗在养虫室饲养柑橘木虱，建立木虱室内种群，供生物测定和筛选木虱寄生菌。 3 柑橘病原菌分离和回接试验 3.1 从柑橘木虱罹病虫体分离昆虫病原 　　2010年4月至12月，在福州宦溪及其它主要产区不同病虫害管理条件下的柑橘及附近九里香上，采集木虱罹病虫体。根据虫体病症，在室内分离、鉴定木虱的病原微生物 3.2 从寄主植物内生菌和叶面附生菌中分离柑橘木虱病原菌 2010年4月至12月，在福州宦溪及其它主要产区不同病虫害管理条件下的柑橘及附近九里香上，采集茎、叶，分离表面附生或内共生的真菌、放线菌和细菌，通过生物测定鉴定它们是否对木虱有致病作用。 3.3 从土壤中分离柑橘木虱病原菌 2010年4月至12月，在福州宦溪及其它柑橘主要产区，采集柑橘、九里香根际土壤，在室内分离真菌、放线菌和细菌，经生物测定，筛选柑橘木虱病原菌。 3.4 生物测定与回接试验 2010年4月至12月，将分离的真菌培养物喷洒到木虱虫体上，进行生物测定，鉴定木虱的真菌类生防菌。采用Mittler and Dadd(1964)的膜取食系统，将待测的细菌和病毒悬浮液加至取食液囊中，对木虱进行胃毒效果测定，由此鉴定木虱的细菌、病毒类天敌微生物。对生物测定中的木虱死亡个体，进行微生物再分离与回接试验，确定病原菌的致死作用。 4 柑橘木虱病原菌的鉴定 2010年4月至12月，对所分离的木虱病原菌进行分类地位鉴定 5 柑橘木虱病原菌生物学特性及活性影响因子研究 2010年08月至2011年03月，在室内研究木虱病原菌的生物学特性，营养需求，以及温、湿条件对病原菌生长和杀虫效果的影响。 6 柑橘木虱病原菌的发酵工艺与制剂生产 2011年04月至06月，研究木虱病原菌培养基配方、需氧量、浓缩方法，确定发酵与制剂生产工艺 7 柑橘木虱病原菌防治效果测定(盆栽苗、田间小区试验) 2011年06月至12月，对木虱病原菌进行盆栽苗和田间小区试验，观察木虱病原菌在田间环境下的杀虫效果。 四、成果提供 柑橘木虱天敌微生物自然发生情况调查报告（1个柑橘产区） 不同产区柑橘木虱天敌微生物的调查与筛选结果 五、研究进度安排 2010年3月至5月 柑橘木虱室内种群与生物测定方法的建立 2010年4月至2011年03月 柑橘木虱病原菌田间发生情况调查与采集 2010年4月至12月 从柑橘木虱罹病虫体分离昆虫病原 从寄主植物内生菌和叶面附生菌中分离柑橘木虱病原菌 从土壤中分离柑橘木虱病原菌 柑橘木虱病原菌的鉴定 2011年01月至03月 柑橘木虱病原菌生物学特性及活性影响因子研究 2011年04月至06月 柑橘木虱病原菌的发酵工艺与制剂生产 2011年06月至12月 柑橘木虱病原菌防治效果测定(盆栽苗、田间小区试验) 四、经费预算与说明 预算 人工费：7400美元 材料费：3000美元 交通：6000美元 电费：1600美元 协作费：3000美元 管理费：1000美元 总计22000美元 说明 人工费： 2个研究生工作10个月，每月补150美元，计2×10×150＝3000美元 　　　　1个研究员工作2个月，每月补1000美元，计2×1000＝2000美元 　　　　1