分光光度法测定鼠疫疫苗浓度方法的建立.pdfVIP

中国医药生物技术 2009年4月第4卷第 2期 ChinMedBiotechnol，April2009，Vo1．4，No2 ll9 · 论 著 · 分光光度法测定鼠疫疫苗浓度方法的建立 魏东，王秉翔，李恪梅，裴明玉，李晓莉，王国治 【摘要 】 2008010、2007l11020071212 目的 研究鼠疫疫苗浓度与吸光度 (A)值之间的相关性， 20070308，2～8℃ 保存 。 建立通过测定 A 值来计算鼠疫疫苗浓度的方法。 中国细菌浊度标准管由中国药品生物制品检 方法 确定分光光度法测定 鼠疫疫苗浓度的特异性、测 定所制备，批号 2008—1。 定波长及线性范围。4个专业的实验室经对 9批成品疫 紫外一可见分光光度计购 自日本岛津公司，型号 苗进行比浊，测定与细菌浊度标准管 (相当于 鼠疫浓度 和编号分别为 ：岛津 UV-1700，207—049；岛津 7．0亿m／1)浊度一致菌液的A值及标准管对应浓度 ±20％ Uv_2450，QC一0017；岛津 Uv_2401，BBC185；岛 (即 5．6亿／ml和 8．4亿m／1)菌液的 A值，根据该结果 滓 Uv_24O1，BBG一025。 制备鼠疫疫苗浓度测定用参考品。4个实验室应用该参考品 1．2 方法 对鼠疫疫苗进行协作测定，确定分光光度法测定鼠疫疫苗浓 1．2．1 分光光度法的特异性以及测定波长的选 度的可行性。 择 将疫苗冻干保护剂与 20倍稀释的 结果 确定 600nm 作为吸光度测定波长，鼠疫疫苗浓度在 批 鼠疫疫苗进行 200～800rim 全波长扫描。分别 测定冻干保护剂及 鼠疫疫苗的 1、8、24、64倍稀 2．6—10．5亿／ml之间时 A 值与菌液浓度之间有很好的相 关性 (r=0．9998，df=3，P0．O1)。成功制备了 3种浓度 释溶液 A6oo。 1．2．2 细菌浓度与 A值之间的相关性测定 将 (即 5．6、7．0和 8．4亿m／1)的鼠疫疫苗浓度测定用参考品， 其 A 值分别为 0．444、0．557和 0．651。经 4个实验室应 鼠疫疫苗稀释成 2．6、5．2、7．0、8．4和 用该参考品对鼠疫疫苗进行协作测定，测定误差小于 5％。 l0．5亿／ml的浓度，测定不同浓度菌液 A6oo。 1．2．3 鼠疫疫苗浓度测定用参考品制备 4个实 结论 分光光度法具有良好的重现性，适用于鼠疫疫苗浓度 验室对 9批成品疫苗进行比浊，测定比浊至细菌 的测定。 浊度标准管 (7．0亿／m1)浊度时菌液的A600值。 【关键词】 鼠疫； 鼠疫疫苗； 分光光度法 根据 比浊结果求出每一批成品的浓度 ，再配制 WWW．Cmbp．net．cn 中国医药!物技术．2009,4(2)：119．122 出每一批疫苗相当于标准管对应浓度 4-20％ (即 5．6亿／ml和 8．4亿／m1)的菌液，测定其 A6oo值， 鼠疫是由鼠疫杆菌引起的自然疫源性烈性传 计算出 3个浓度菌液的A6oo值的均值，根据该结