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考点2 动物细胞工程(5年9考)
(2013安徽卷、浙江卷、重庆卷、海南卷……)
1.动物细胞培养
过程:
2.动物细胞培养的条件
(1)无菌、无毒:对培养液和所用培养用具无菌处理,添加抗生素;定期更换培养液以清除代谢产物。
(2)营养:除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入血清血浆等天然成分。
(3)适宜的温度和pH:温度为36.5±0.5_℃(哺乳动物),pH为7.2~7.4。
(4)气体环境——95%空气+5%CO2(维持培养液的pH)
3.动物体细胞核移植及克隆技术引发的伦理问题
(1)原理:动物细胞核具有全能性
(2)核移植过程(以高产奶牛克隆为例)
(3)克隆人的类型及其伦理问题
类型
项目 治疗性克隆 生殖性克隆 区别 目的 治疗人类疾病 用于生育,产生新个体 水平 细胞水平 个体水平 联系 都属无性繁殖;产生新个体、新组织,遗传信息相同 中国
政府
的态度 中国政府的观点:不赞成,不允许,不支持,不接受任何生殖性克隆人的实验,不反对治疗性克隆 4.单克隆抗体制备
(1)诱导动物细胞融合的原理:细胞膜具有一定的流动性。
(2)诱导动物细胞融合的方法:物理法——离心、振动、电激等;化学法——聚乙二醇;生物法——灭活病毒。
(3)单克隆抗体制备过程
(4)单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高,可大量制备。
(5)单克隆抗体的应用:作为诊断试剂;用于治疗疾病和运载药物。
5.比较动物细胞培养、核移植与动物细胞融合
比较 动物细胞培养 核移植 动物细胞融合 原理 细胞增殖 动物细胞核的全能性 细胞膜的流动性 过程 结果 相同分化程度的细胞群 与供体基本相同的个体 杂交细胞 关键
环节 细胞增殖(分裂)、细胞癌变 核融合、细胞分化 人工诱导细胞膜融合 应用 ①生产生物制品
②基因工程
③检测有毒物质 ①加速良种繁育
②保护濒危物种
③生产医用蛋白
④提供克隆器官、
组织等 获得杂种细胞,制备细
胞产物如单
克隆抗体 思维激活
判断正误
(1)植物组织培养常用液体培养基,动物细胞培养常用固体培养基( )。
(2)具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞是生物克隆的重要条件之一( )。
(3)一般血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物,单抗则识别抗原分子的特殊部位,具专一性( )。
(4)细胞克隆的基本要求是:必须保证分离出来的细胞是一个而不是多个( )。
(5)在培养瓶中要定期用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离,制成悬浮液( )。
(6)二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的( )。
(7)核移植过程中供体理论上是提供细胞核,但操作过程中可以把整个体细胞注入去核的卵母细胞中去( )。
答案 (1)× (2)√ (3)√ (4)√ (5)√ (6)× (7)√
思考与填空
仔细阅读图示及相关内容辨析并填充其含义
从A、B到C的过程可以表示不同的含义(如图所示):
①若A、B为动物细胞,则该过程表示细胞融合;
②若B为精子,A为卵细胞,则该过程表示受精;
③若A为除去细胞核的卵母细胞,B为细胞核,则该过程表示核移植。
动物细胞培养技术
1.(2013·浙江理综,6)实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是( )。
A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒
B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C.丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
D.丁过程得到的细胞具有异质性
解析 取小鼠皮肤组织进行培养时需对实验小鼠进行消毒;通过胰蛋白酶消化皮肤组织可获得皮肤细胞;丙过程为最初的传代培养,得到的细胞大多具有正常二倍体核型;来源于多个细胞的非克隆培养所得到的细胞系具有异质性,该实验小鼠皮肤细胞属于非克隆培养,丁过程得到的细胞具有异质性。
答案 C
题后归纳
(1)动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养的原因:幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低,增殖能力很强,更易于培养。
(2)在动物细胞培养过程中两次用到胰蛋白酶:第一次是将剪碎的组织分散成单个细胞;第二次是将贴壁细胞从瓶壁上分离下来,目的是避免动物细胞的接触抑制现象。
(3)细胞贴壁和接触抑制
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。
(4)原代培养与传代培养
①原代培养:细胞悬液第一次在瓶中培养,没有分瓶培养之前的细胞培养。
②传代培养:原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后,由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭,影响细胞的生长,因此需要重新用胰蛋白酶等处理,进行分瓶扩大培养,即传代培养。
单克隆抗体的制备过程及选择培养基的制备
2.(2013·海南卷,3
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