2015届高考生物总复习考点2《基因工程的基本操作程序及蛋白质工程》(5年23考)新人教版.docVIP

考点2　基因工程的基本操作程序及蛋白质工程(5年23考) (2013全国课标卷Ⅰ，40、福建理综，33……) 1．基因工程的操作程序(四步曲) (1) (2) (3)方法 (4) 2．基因工程的应用 技术名称 应用 植物基因 工程 培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质 动物基因 工程 提高动物生长速度，改善畜产品的品质，用转基因动物生产药物，用转基因动物作器官移植的供体 基因治疗 把正常基因导入病人体内，使其表达产物发挥作用，从而治疗疾病，分为体内基因治疗和体外基因治疗 思维激活 判断正误 (1)外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制(2013·安徽卷，6B)(　　)。 (2)关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度：乳腺癌细胞易于乳腺细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞(2011·上海，15A)(　　)。 (3)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada(2011·浙江理综，6C)(　　)。 (4)启动子也称起始密码子，终止子也称终止密码子(　　)。 (5)用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞膜的通透性(　　)。 (6)利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中(　　)。 (7)基因工程药物主要来源于转基因动物生产(　　)。 (8)为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体(　　)。 (9)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用(　　)。 答案　(1)×　(2)√　(3)×　(4)×　(5)×　(6)×　(7)×　(8)×　(9)× 　基因工程的操作程序 1．(2012·福建理综，32)肺细胞中的let－7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let－7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。 图1 图2 请回答下列问题。 (1)进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let－7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let－7基因转录，该部位称为________。 (2)进行过程②时，需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。 (3)研究发现，let－7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取________进行分子杂交，以直接检测let－7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中________(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。 解析　此题考查基因工程应用的相关知识。(1)构建基因表达载体时，需要用同种限制酶切割目的基因和载体，使之产生相同的黏性末端。载体应有启动子、终止子和标记基因，其中启动子是RNA聚合酶识别和结合部位，驱动基因转录。 (2)动物细胞培养时，常用胰蛋白酶处理贴壁的细胞，使之相互分离，以利于传代培养。(3)检验目的基因是否表达，常用分子杂交技术。从被导入目的基因的细胞内提取RNA，与目的基因单链杂交，如果出现杂交带，说明目的基因已转录。由图2知，当let－7基因转录出来的miRNA与癌基因RAS转录出的mRNA杂交时，就会抑制RAS蛋白的产生，故肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中RAS蛋白含量减少引起的。 答案　(1)限制性核酸内切(或限制)　启动子　(2)胰蛋白　(3)RNA　RAS蛋白 题后归纳 1．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。 (2)基因表达载体组成 (3)构建过程 2．目的基因导入受体细胞 受体 细胞 种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 (大肠杆菌) 常用 方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 Ca2＋处理法 受体 细胞 体细胞或受精卵 受精卵 原核细胞 转化 过程 将目的基因插入Ti质粒的T－DNA上―→导入农杆菌―→侵染植物细胞―→目的基因整合到受体细胞的DNA上，并稳定维持和表达其遗传性 将含有目的基因的基因表达载体提纯―→取受精卵―→显微注射―→受精卵移植―→获得具有新性状的动物 用Ca2＋处理受体细胞―→感受态细胞―→将重组表达载体与感受态细胞混合―→感受态细胞吸收DNA分子 3.目的基因的检测与鉴定 　基因工程的应用 2．(2013·山东潍坊一模，36)如图为培育转基因抗虫棉的技术流程，请据图回答问题。 (1)质粒上标记基因的作用是 ___