东海原甲藻与光周期效应研究.docVIP

东海原甲藻的光周期效应研究 孙岁寒，段舜山* 暨南大学水生生物研究所，广东 广州 510632 摘要：以东海原甲藻Prorocentrum donghaiense Lu为试验材料，设置了短光周期（A）和长光周期（B）两组试验：A组分光周期1、2、4、6、8、10和12 h 7个处理，B组分光周期12、14、16、18、20、22和23 h 7个处理，测定了东海原甲藻的细胞密度、叶绿素a含量、蛋白质含量、生物量和可溶性糖等指标。结果表明，在13个不同的光周期处理中，随着光周期的不断延长，东海原甲藻的细胞密度等一系列指标值均不断上升，各指标和光周期的长度呈现正相关的关系。结果表明东海原甲藻是一种喜长光照的赤潮藻类。 关键词：东海原甲藻；光周期；叶绿素-a；蛋白质；生物量；可溶性糖 中图分类号：Q949.210 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2006）03-0461-04东海原甲藻Prorocentrum donghaiense Lu是甲藻门Pyrrophyceae、原甲藻目Prorocentrales、原甲藻科Prorocentraceae、原甲藻属Prorocentrum的单细胞赤潮藻种。细胞呈不对称梨形，长15～22 μm，宽9～14 μm，营单细胞生活，有时形成2～4个细胞的短链[1]。在2000—2004年连续几年的5月份，我国的长江口和舟山群岛海域爆发了大规模的东海原甲藻赤潮，覆盖海域面积达到3000～7000 km2，最大细胞密度达3.6×108 个?L-1。该赤潮不仅使海洋生态环境受到严重威胁,而且对海洋渔业生产和水产品安全造成了损失，引起了海洋生态环境学术界的广泛关注[1-3]。但是, 目前关于东海原甲藻光周期效应的研究工作尚未见报道。开展东海原甲藻在不同光周期条件下的生理生态反应研究，探讨东海原甲藻适宜生长的光周期范围, 不仅在理论上能够揭示东海原甲藻的生长发育与光周期因子之间的关系规律，而且在实践中可望为有效预测和预防东海原甲藻赤潮的发生提供参考资料。 1 材料和方法 1.1 藻种来源和培养条件 试验藻种东海原甲藻来自暨南大学水生生物研究所藻种室。采用f/2培养基在LRH-400-G型培养箱中静置扩养至对数生长期。每个处理均取对数生长期的藻液接入1000 mL锥形瓶的600 mL培养液中，培养温度为（20±1）℃，光照强度100~110 μmol·ｍ-2·s-1, 35±1, pH 为7.0~7.4。 1.2 试验设计 分别设置了短光周期（A）和长光周期（B）两组光周期调控试验，A组分1、2、4、6、810和12 h 7种处理；B组分12、14、16、18、20、22和23 h 7种处理。采用铝箔包裹锥形瓶的遮光方法，每一处理设3个重复，从接种日开始培养观测14 d，每隔48 h取样1次，分别测定细胞密度、叶绿素a含量，蛋白质含量和生物量等指标。 1.3 测定方法 （1）细胞密度：细胞密度的测定采用血球板细胞计数法。 （2）叶绿素a的测定：采用国家海洋局《海洋监测规范》所推荐的分光光度法[4]。 （3）蛋白质的测定：采用张志良等[5]《植物生理学实验指导》中的紫外吸收法测定。 （4）生物量的测定：取40 mL藻液，离心收集藻细胞，经过恒温干燥箱100 ℃烘干至恒质量，用电子天平称出藻细胞的干质量作为藻细胞的生物量[6]。 （5）可溶性糖：采用张志良等[5]《植物生理学实验指导》中的蒽酮比色法测定。 2 结果与分析 2.1 细胞密度 从短光周期组（图1A）和长光周期（图2A）的结果来看，东海原甲藻细胞的生长表现出良好的规律性，随着光周期的延长，藻细胞数量逐渐上升。这一趋势在短光周期组中表现的更为明显，除光周期1 h和2 h处理组的藻细胞几乎不生长外，各光周期处理的生长曲线间表现出显著的差异，在短光周期组中，在整个培养期间，每次取样测量都得到细胞数目和光照时间正相关的结果，在这组中，12 h光周期处理组的细胞密度在整个培养期间都保持了最高值。 图1 不同光周期处理下的生长曲线.（A）光周期少于12 h；（B）光周期长于12 h Fig. 1 Growth curves of P.donghaiense under different treatments of photoperiod. A photoperiod ≤12 h ； B photoperiod ≥12 h 在长光周期组中，除22 h和23 h两处理组外，其他各处理组在第0~8 天内的细胞密度值很接近，从第8天以后，细胞密度随光照时间延长而出现相互差异。而光周期最长的23 h和22 h处理组则几乎一直保持了本组的最高和次高细胞密度值，在第14天时分别达到137.3×103 个·mL-1和