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中文摘要
膜炎3例,变态反应性脑炎10例,新型隐球菌脑膜炎4例,
脑囊虫病3例,单纯疱疹病毒性脑炎2例,多发硬化3例,
其他神经系统疾病9例。对所有患者均进行脑脊液常规、生
化,细胞学检查(MGG染色),墨汁染色和阿利新兰染色。
同时用免疫荧光的方法检测单核细胞内的结核菌PPD抗原,
取脑脊液lml,用FMU-5型玻片离心机离心玻片3张,进行
免疫荧光染色。将沉淀有细胞的玻片放入冷丙酮中4C固定
缓冲液,pH为7.4,以增加细胞膜的通透性)缓冲液冲洗3
次,每次5分钟,再移入含有3%正常羊血清的TBS中孵育
30分钟,用滤纸吸干后滴加兔抗结核抗体IgG,4℃冰箱孵
育过夜。取出后用TBS-T缓冲液充分冲洗,吹干后滴加荧光
素标记的羊抗兔IgG,37℃孵育30分钟。TBS-T缓冲液冲洗,
伊文思兰衬染3分钟,再用TBS洗两次。吸干水分,用缓冲
甘油封片,荧光显微镜观察。阳性结果为单核巨噬细胞的胞
浆黄绿色荧光染色。以TBS缓冲液替代一抗为阴性对照。上
述指标动态观察,每隔5~7天检测一次,连续检测3次以
上。
结果:l、细胞学表现:结脑组脑脊液中以嗜中性粒细
胞为主的混合细胞反应12例,以淋巴细胞为主的混合细胞
反应14例,单纯混合型细胞反应4例,淋巴样细胞反应5
例,阿利新兰染色和墨汁染色均阴性。对照组脑脊液中混合
型细胞学反应15例,淋巴样细胞反应17例,4例隐球菌脑
膜炎患者CSF中可见隐球菌,阿利新兰染色和墨汁染色均阳
性,脑囊虫患者显示嗜酸性粒细胞增加。在动态观察中显示
结脑病人随治疗好转中性粒细胞逐渐减少,但持续较长时
中文摘要
间,同时激活的淋巴细胞单核细胞逐渐增加,浆细胞出现,
这与结脑动态变化相符。2、单核细胞内结核抗原检测的结
果:早期即可在CSF中检测到单核细胞内的结核抗原,大多
数单核细胞都有较强的胞浆染色,且多次检测可持续阳性。
激活单核细胞较少染色或染色较浅,早期嗜中性粒细胞胞浆
也有染色,但持续时间短。在35例结脑患者中阳性者29
例,均至少连续2次检测阳性,敏感性为82.9%,发病≤14
天者15例阳性,占93.8%,15~30天者11例阳性,占84.6%,
30天者3例阳性,占50%。对照组无一例阳性,特异性为
100%。结脑病人的动态观察显示,最早在发病6天即可检测
出胞内抗原,连续2次阳性者29例,3次阳性者25,4次
及4次以上阳性者20例。部分病例在病情好转后单核细胞
内结核抗原检测可以转阴。
结论:本实验通过用免疫荧光法检测结脑患者脑脊液
单核细胞内的结核抗原,成功的建立了结脑患者脑脊液中细
胞内结核抗原检测的方法。
本研究显示在结脑的早期即可在CSF中检测到单核细
胞内的结核抗原,且多次检测可持续阳性,证实了结核菌可
进入单核细胞并得以存活。并且结核菌进入细胞内,发生在
抗原呈递、细胞免疫和体液免疫之前,可以解决早期诊断的
问题。
结核菌的控制主要依赖于单核细胞的活化,活化的单核
细胞可以降解、清除结核菌。本实验也发现激活的单核细胞
很少染色或染色较浅,说明其中的抗原含量较低,这也证实
了上述观点。
结脑病人的动态观察显示,最早在发病7天即可检测出
中文摘要
胞内抗原,发病早期检测的敏感性高,随病程延长敏感性下
降,部分患者在病情好转后单核细胞内结核抗原检测可以转
阴。这也说明该方法适于早期诊断。
该方法敏感性为82.9%,特异性为100%,快速、简便,
在发病早期即可检测出细胞内抗原,且特异性较高,是结脑
早期诊断的有效手段。
关键词:结脑;脑脊液;单核细胞内结核抗原;免疫
荧光;诊断
4
英文摘要
the of
ofdetection
Thevalue antigens
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in ofCSF
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