04章_临床酶学检验技术.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * （一）仪器 　　　待测物的摩尔吸光系数与仪器波长的准确性、带宽、比色杯透光性有关。K值的设置还需考虑稀释体积、比色杯的光径、副波长等因素影响 （二）校准物 （三）实验参数 （四）副反应的干扰 其他因素的影响 三 * 实测K值 理论K值 校准K值 其他因素的影响 三 K值的校正 * S P E t 酶量 合适的 测定方法 激活剂 反应时间 10 ～20 Km 缓冲液 温度 vo = P t 去除 抑制剂 底物 返回章目录 * 电泳法 一 抑制法 二 第六节 同工酶检测技术 其他方法 三 * * 蛋白质 同工酶 支持物准备、平衡、 加样、电泳 固定后染色 蛋白质染料 不固定 酶促反应产物显色 扫描定量 扫描定量 电泳法测定同工酶与蛋白质区别 支持物准备、平衡、 加样、电泳 * 原理： 　　　免疫抑制法原理 亚基的特异性抗体---同工酶亚基特异结合 化学抑制法原理 化学试剂选择性抑制某类同工酶 评价： 　　　优点：特异性高 缺点：免疫抑制成本高：化学抑制法往抑制不彻底。 抑制法 二 * 原理： 　　 利用各型同工酶对热的稳定性差异的原理来测定同工酶。　　　 ALP对热稳定性：胎盘型小肠型其他型。若经65℃15min的样品预处理后只留下胎盘型同工酶。 评价： 　　　因特异性