转ZmPP2C2 基因烟草对逆境胁迫与响应.docVIP

目 录 摘 要 1 Abstract 3 英文缩写符号及中英文对照表 5 1. 引言 6 1.1 逆境胁迫与信号转导 6 1.1.1 细胞信号转导系统 7 1.1.2 蛋白质的可逆磷酸化 8 1.2 蛋白磷酸酶 8 1.2.1 蛋白磷酸酶的发现 8 1.2.2 植物中的蛋白磷酸酶 9 1.2.3 植物中PP2C的生化特性与蛋白质结构 10 1.2.4 PP2C的进化 11 1.2.5 植物中PP2C的功能 12 1.3 本课题研究目的及意义 16 2. 材料与方法 18 2.1材料的选择与种植 18 2.1.1 材料的选择 18 2.1.2 材料的培养 18 2.2 材料处理 18 2.2.1 低温处理 18 2.2.2 NaCl处理 18 2.2.3 PEG处理 18 2.3 试验方法 19 2.3.1 转基因烟草植株筛选 19 2.3.2 转基因植株的表型分析 19 2.3.3 转基因植株生理指标的测定 21 2.4 试验数据处理 23 3. 结果与分析 24 3.1转基因烟草植株的表型分析 24 3.1.1 转基因和野生型烟草植株在1/2 MS 培养基及在含NaCl、甘露醇的1／2MS培养基的萌发情况 24 3.1.2 转基因植株烟草的PCR检测 25 3.2 低温胁迫对转基因烟草植株生理特性的影响 25 3.2 1 转ZmPP2C2基因烟草植株耐冷性分析 25 3.2.2 低温胁迫对转基因烟草和野生型烟草膜脂电解质外渗的影响 25 3.2.3 低温胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片脯氨酸和可溶性糖含量的影响 26 3.2.4 低温胁迫下转基因烟草和野生型烟草SOD和POD含量的变化 27 3.3盐胁迫对转基因烟草植株生理特性的影响 29 3.3.1 盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片气体交换参数的影响 29 3.3.2 盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片荧光参数的影响 30 3.3.3 盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草膜透性的影响 30 3.3.4 盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草丙二醛的影响 31 3.3.5 盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草抗氧化酶活性的影响 32 3.3.6 盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片Pro和WSS含量的影响 33 3.3.7 盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片可溶性蛋白和叶绿素含量的影响 34 3.4 PEG处理对转基因烟草生理特性的影响 35 3.4.1 PEG处理对转基因烟草和野生型烟草叶片气体交换参数的影响 35 3.4.2 PEG处理对转基因烟草和野生型烟草膜透性的影响 36 3.4.3 PEG处理对对转基因烟草和野生型烟草丙二醛含量的影响 36 3.4.4 PEG处理对转基因烟草和野生型烟草抗氧化酶活性的影响 37 3.4.5 PEG处理对转基因烟草和野生型烟草叶片Pro、WSS含量的影响 38 3.4.6 PEG处理对转基因烟草和野生型烟草叶片可溶性蛋白含量的影响 39 4. 讨论 40 4.1 转基因烟草对低温胁迫的响应 40 4.2 转基因烟草对盐胁迫的响应 40 4.2.1 盐胁迫下转基因烟草叶片光合能力的维持 40 4.2.2 盐胁迫对转基因烟草叶片膜脂过氧化及体内保护系统的影响 41 4.3 转基因烟草对干旱胁迫的响应 41 5. 结论 42 参考文献: 43 致谢 53 硕士期间发表的论文 54 转ZmPP2C2基因烟草对逆境胁迫的响应 研 究 生 萧蓓蕾 指导教师 摘要 2C（PP2C）, 其生化性质、蛋白质组成与结构都和其他磷酸酶显著不同，但都在细胞信号转导中扮演重要角色。高等植物中的PP2C广泛参与脱落酸（ABA）ABA诱导的种子休眠、保卫细胞及离子通道调控和气孔关闭、逆境胁迫等。PP2C也参与植物创伤反应、生长发育以及抗病性等。作为大多数信号途径的负调控因子，PP2C能直接与激酶结合，与其他调控蛋白结合，以及直接与DNA结合调控相关基因的表达。 本文以转ZmPP2C2基因烟草野生型烟草为材料，溶液培养幼苗，采用低温、盐胁迫、处理方式，研究转ZmPP2C2基因烟草对逆境胁迫，为改良农作物抗逆性提供依据。主要结果如下： 转ZmPP2C2基因烟草基因PCR鉴定逆境胁迫（低温、盐、干旱）下，两种类型烟草叶片的相对电导率、MDA的含量都呈上升趋势，但转基因烟草相对电导率和MDA含量较野生型烟草低，说明转基因烟草膜脂过氧化程度低于野生型烟草，这有利膜功能维持。 3逆境胁迫（低温、盐、干旱）下，转基因草相容性物质如脯氨酸可溶性糖的积累明显高于野生型烟草低温下两种类型烟草叶片的上升趋势但转基因烟草野生型烟草盐胁迫下两种类型烟草叶片的但转基因烟草低温下两种类型烟草叶片的但转基因烟草盐胁