通心络对气虚和气滞型血管内皮损伤相关基因表达谱的影响.pdfVIP

维普资讯 第32卷第21期 中 国 中药 杂 志 Vo1．32，Issue 21 2007年 11月 ChinaJournalofChineseMateriaMedica November，2007 通心络对气虚和气滞型血管内皮损伤 相关基因表达谱的影响 吴以岭 ，栗彦宁 ，齐锦生 ，贾振华 ，刘 昆 (1．河北医科大学生物化学与分子生物学教研室，河北 石家庄050017； 2．河北以岭医药研究院，河北 石家庄 050035) [摘要] 目的：探讨气虚和气滞型血管内皮损伤相关的炎症、氧化应激等7组基因表达谱的异同，及通心络对 基因表达谱的影响。方法 ：用高 ￡-蛋氨酸复制sD大鼠血管内皮损伤，并附以负重游泳法和束缚法分别制造气虚和 气滞证实验模型。应用 RT．PCR技术和NCBI提供的基因表达系列分析(SAGE)数据库及在线工具，分析气虚和气 滞型内皮损伤相关的炎症、氧化应激等7组基因表达谱的变化，以及通心络对基因表达谱的影响。结果：与正常组 相比，气虚组炎症相关环氧合酶．1(COX．1)、环氧合酶 (COX-2)，氧化应激相关诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、超氧 化物歧化酶(SOD)及血管舒缩相关 内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)、内皮素转换酶 (ECE)基 因的表达均显著升高 (P0．05或P0．01)，前列环素合酶 (PCS)基因表达变化无统计学差异 ，通心络治疗后这些基因的表达降低 (P0．05或P0．01)；气滞组COX·1，COX-2，iNOS及 eNOS，ECE基 因表达亦显著升高 (P0．01)，PCS和 SOD 基因表达显著下降(P0．01)，通心络治疗后这些基因的异常表达趋于正常(P0．01)。结论：气虚和气滞型血管 病变中，内皮损伤7组相关基因表达谱不尽相同，而通心络能改善这些基 因表达谱的异常，从而起到保护血管内皮 免受损伤的作用。 [关键词] 通心络；内皮损伤 ；炎症；氧化应激；基因表达谱 [中图分类号]R285．5 [文献标识码]A [文章编号]1001-5302(2007)21-2268-05 通心络胶囊是依据中医络病理论研制而成的中 健康雄性sD大鼠，清洁级，体重200～250g，由 药复方制剂，由人参 、水蛭 、全蝎、土鳖虫、蜈蚣等配 河北省实验动物中心提供，合格证书：冀医动管字 伍而成 ，具有活血益气、通络止痛的功效，对防治血 04259号 。 管病变有 良好的效果…，但通心络的作用机制尚不 1．2 主要仪器、药品与试剂 明了。为进一步探讨气虚和气滞型血管病变中，炎 圆形游泳缸 (直径25cm、高60cm)，自制夹具 症和氧化应激相关基因在内皮细胞损伤中的表达状 (松紧度可据动物情况调整)，480型基因扩增仪 (美 况及通心络对其表达谱的影响，本研究利用 SAGE 国PE公司)，H一7500透射 电子显微镜 (日立公 数据库从信息学角度分析其表达谱，并采用半定量 司)；一蛋氨酸(石家庄市维诺伟业生物制品有限公 RT-PCR方法检测气虚，气滞及通心络治疗情况下 司)，通心络 (以岭药业有限公司，批号061012)，RT— 基因谱的表达水平 ，以探讨气虚型和气滞型血管内 PCR试剂盒(Promega，批号240215)，引物 由上海生 皮损伤相关基因表达谱的异同，及通心络对基因表 工合成，其余试剂均为国产分析纯。 达谱的影响。 2 方法 1 材料 2．1 气虚型血管内皮损伤模型的建立及分组 1．1 动物