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PICK1及其结构域的表达，纯化和部分功能 【摘要】：蛋白激酶Cα相互作用蛋白(proteininteractingwithCαkinase，PICK1)是蛋白激酶Cα(proteinkinaseCα，PKCα)的靶蛋白之一，也是衔接PKCα和膜上众多受体的关键蛋白之一。PICK1在人和动物的细胞或组织内均可表达，以大脑和睾丸中表达最高，肺中最低。在许多细胞中，PICK1一般存在于细胞质中，常富集于核周区，且是不对称分布，多半是在靠近粗面内质网和高尔基体。小鼠来源的PICK1由416氨基酸残基组成，在其N-端含有PDZ结构域(PSD95DiscslargeandZol)，C端区域为一个BAR结构域(Bin／amphiphysin／RVS)，靠近C末端又含一个酸性氨基酸区。PICK1蛋白的结构是非常独特的，目前在NCBI数据库中未发现类似的同时含PDZ结构域和BAR结构域的蛋白。已报道的PICK1的配体的作用区大多集中在其PDZ结构域部分，该结构域和受体蛋白、转运蛋白、衔接蛋白均有相互作用。BAR结构域参与了和GRIP蛋白以及膜的结合。然而，PICK1和这些膜蛋白的相互作用的作用机理与生物学意义还不是很清楚。本研究对PICK1蛋白及其BAR结构域和PDZ结构域分别进行了基因克隆和表达以及产物纯化，并对其部分理化性质进行研究。根据报道的PICK1基因序列，设计PCR引物，以重组质粒pR