磁性纳米粒子电化学发光免疫传感器研究及CA125测定论文.pdfVIP

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2017-08-31 发布于安徽
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磁性纳米粒子电化学发光免疫传感器研究及CA125测定论文.pdf

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磁性纳米粒子电化学发光免疫传感器研究及CA125测定 * 徐倩，魏小平，李建平，陶慧林，郝再斌桂林理工大学化学与生物工程学院，桂林541004 *联系人：0773-5895622; likianping@263.net 磁性纳米粒子生物相容性好，可用于生物分子的固定；比表面积大，能提高 [1] 检测的灵敏度。磁性纳米粒子-免疫传感器则将高灵敏的传感技术与特异性免 [2] 疫反应结合了起来。磁性纳米粒子敏感膜电化学传感器通常以伏安法或电位法进行检测。电化学发光（ECL ）是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发 [3] 光反应，包括了电化学和化学发光两个过程。ECL检测灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快。将磁性纳米粒子结合免疫分析，用于制作磁性纳米粒子电化学发光免疫传感器，通过进行电化学发光检测，不但可以大大地提高检测的灵敏度，而且能提高免疫试剂在电极表面的固定量，提高免疫反应活性，能够为生物活性分子的灵敏检测提供良好的分析器件和分析新方法。本文结合磁性纳米粒子制作电化学发光免疫传感器用于CA125 的检测，此方法检出限低，线性范围宽。结合磁性纳米粒子制作的CA125 电化学发光免疫传感器未见报道。与传统的检测相比，该传感器检测的灵敏度高，电极易更新。 1 实验部分首先将CA125抗体共价结合到磁性纳米粒子上，再通过磁力修饰在预处理好的SPCE表面。该电极首先在1% BSA溶液中37℃温育30 min 以封闭非特异性吸附位点，用PBST缓冲液清洗。然后特异性结合CA125抗原，最后抗原和GOD标记的CA125抗体特异性结合，形成三明治结构的免疫传感器。将10 mL的葡萄糖-鲁米诺-Tris-HCl缓冲溶液转至石英烧杯中，然后采用三电极系统进行测试，并测定ECL 的强度。扫描范围为-0.3 ~ 0.6 V ( vs. SCE ) ，扫速为100 mV/s。光电倍增管高压600 V，采样速率10 T /S，放大倍数4 ，测量时间90 s 。SPCE不用时置于冰箱中4 ℃下保存。 2 结果讨论裸电极和免疫传感器分别在发光底液中进行检测，记录响应电流和电化学发光曲线，如图1 所示。 1000 0.3 b 0.2 0 b 800 a 0.1 0 A 0.0 y µ t i 600 / -0.1 s i n e t -0.2 n I 400 -0.3 L C -0.4