复脑灵对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马细胞凋亡的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要 1 英文摘要 3 引 言 6 正 文 9 1 实验材料和方法 9 1.1 实验对象 9 1.2 实验药物 9 1.3 试剂及仪器 9 1.4 动物模型制作 11 1.5 实验分组 12 1.6 给药方法 12 1.7 行为学检测 12 1.8 标本采集及处理 14 1.9 统计学处理 17 2 实验结果 17 2 .1 大鼠脑缺血再灌注后神经行为改变 17 2 .2 HE 检测结果观察 20 2 .3 T U N EL 及凋亡指数 21 3 讨论 23 3 . 1VD 的病名、病因病机、辨 分型及治疗专法的探讨 23 3 .2 动物模型的建立及其与 VD 、脑组织损伤、神经行为学关 系的讨论 28 3 .3 复脑灵 口服液的来源、组方、研究进展及其与 VD 的关 系 30 3 .4 水迷宫实验与行为学 习记忆的关系及其实验结果讨论 . 35 3 .5 细胞凋亡与 VD 、脑组织损伤的关系及其结果讨论 36 4 存在的问题及展望 40 结 论 42 参考文献 43 附 图 48 综 述 51 致 谢 58 攻读学位期间发表的学术论文目录 59 作者声明 60 个人简历 61 文 摘 要 目 的：本实验通过观察复脑灵口服液对血管性痴呆大鼠模型学习记忆 功能及海马细胞凋亡的研究，进一步探讨其对神经细胞的保护作用及作 用机制。 方 法：采用无创动脉夹反复夹闭颈总动脉结合腹腔注射硝普钠降压的 方法制作大鼠拟血管性痴呆动物模型。把50 只健康的雌雄各半SD 大鼠 随机分成5 组，假手术组(A 组) 、模型组(B 组) 、复脑灵口服液低剂量组 (C 组) 、中剂量组(D 组) 、高剂量组(E 组),每组 10 只，各组大鼠于术后第 3 天开始给药，每日灌胃给药 1 次，连续21 日。各组于灌胃停 后第二 天，采用MWM 测试法进行水迷宫实验，及连续5 天做定位航行实验(place navigation) ，第6 天开始做空间探索试验(spacial probe test) ，实验结束后 断头取脑，应用 HE 染色查看脑组织，TUNEL 技术原位标记凋亡细胞。 结 果：水迷宫定位航行实验显示，模型组逃避潜伏期（escape laten ）5 天内变化平缓，给药治疗的各组潜伏期随着训练天数的增加而明显缩短， 模型组逃避潜伏期与其他各组相比具有显著性差异(P0.01)。低剂量组、 中剂量组、高剂量组逃避潜伏期均值从大到小依次排列，且各给药组两 两相邻间比较无显著性差异(P0.05), 不相邻间两组比较有统计学意义 (P0.05) 。水迷宫空间探索试验显示，跨平台次数中，各组与模型组比较 均有显著性差异(P0.01) 。给药组相邻两组间两两比较，无显著性差异 (P0.05) ，而不相邻两组比较具有统计学意义(P0.05)。 HE 染色后，观察显示：除假手术组和高剂量组外，各组均有不同程 度的细胞损坏和萎缩。在大脑皮质、海马区出现了不等量的神经元细胞 变性，及细胞死亡。病变神经元细胞体积缩小，核膜核仁模糊不清。 TUNEL 技术原位标记细胞凋亡示： 假手术组偶见TUNEL 阳性反 应物；②模型组大鼠在海马CA1 区可见较多棕黄色TUNEL 反应阳性细 胞；③复脑灵口服液各组大鼠海马CA1 区可见TUNEL 反应阳性细胞但 1 较模型组明显减少；④模型组凋亡指数显著高于假手术组(P ﹤0.01) 。复 脑灵口服液组凋亡指数显著低于模型组(P ﹤0.01) ，而且复脑灵口服液相 邻组间两两比较无显著性差异 (P0.05) ，不相邻两组比较具有统计学意 义(P0.01)。 结 论：复脑灵口服液对缺血再灌注损伤大鼠的学习和记忆能力方面具 有提高和改善作用，对缺血再灌注损伤大鼠脑组织内海马细胞凋亡具有 明显的抑制作用。 关键词: 复脑灵口服液；神经行为学；细胞凋亡