反相毛细管电色谱硅胶整体柱制备及其应用.pdfVIP

反相毛细管电色谱硅胶整体柱的制备及其应用 * 笪振良，丁国生 ，袁瑞娟，李侃 （天津大学药物科学与技术学院，天津 300072） 摘要 采用改进的溶胶-凝胶技术制备了具有高机械强度和化学稳定性的毛细管硅胶整体柱。详细考察了反 应物配比对所制备整体柱结构和性能的影响，并在此基础上对制备条件进行了优化。将所制备整体柱用正 辛基硅烷修饰后得到反相整体柱，详细考察了流动相pH 值、有机改性剂含量对电渗流的影响。采用短端进 样方式在优化实验条件下实现了中性化合物的快速分离，对硫脲获得了高达 180,000 N/m 的柱效。使用所 制备整体柱,在电色谱模式下对穿心莲片中的有效成份脱水穿心莲内酯进行了分离,并获得了高达 80,000 N/m的柱效。 关键词 硅胶整体柱，反相毛细管电色谱，制备 ，脱水穿心莲内酯 1 引言 毛细管电色谱（Capillary electrochromatography , CEC ）是近年发展起来的一种以电渗流 为驱动力的微分离分析技术。它结合了微柱液相色谱(μ-HPLC) 的高选择性和毛细管区带电 泳(CZE)的高效性，具有高效、快速、微量的特点，成为目前微分离分析领域的研究热点之 一。CEC 依固定相的存在方式可被分为三类：开管柱、填充柱和整体柱。CEC 开管柱虽可 获得很高的柱效，但它也有相比较低、柱容量较小及检测灵敏度低的缺点。而 CEC 填充柱 因其制备过程复杂且易产生气泡，也限制了其应用。CEC 整体柱的制备由于采用了原位聚 合技术，克服了以上缺点；同时，聚合单体的选择范围很广，可以在固定相中引入各种可能 的作用基团，实现多种分离模式。因此，它被誉为第四代分离介质而受到色谱工作者的广泛 [1~3] 关注 。 毛细管整体柱按基质材料可分为有机基质整体柱和无机基质整体柱。有机聚合物整体柱 易在有机溶剂中发生溶胀现象而改变其孔结构，进而影响其色谱性能；相比之下，硅胶基质 整体柱的机械强度较高，耐溶剂性能和热稳定性能较好，同时在孔结构控制方面也有一定的 优势。毛细管硅胶基质整体柱通常采用酸性条件下的原位溶胶-凝胶技术来制备，并可根据 需要随后用官能试剂对柱床进行衍生[4,5] 。为避免整体柱制备过程中毛细管力导致整体柱床 [5, 6] 收缩而产生裂缝，通常在灼烧过程中采用程序升温和降温的方式 。 ___________________________________ 作 者 简 ： 丁 国 生 ， 男 ， 讲 师 ， 主 要 从 事 色 谱 分 离 材 料 研 究 , Tel: (022) E-mail: ding_speaker@. 1 本文采用改进的溶胶-凝胶制备技术，成功制备了具有高机械强度和化学稳定性的毛细 管硅胶整体柱，并详细考察了制备条件对柱结构和性能的影响。使用辛基硅烷化试剂对所制 备整体柱进行化学修饰， 并采用短端进样方式，实现了系列中性化合物的快速分离。最后， 用所制备整体柱对穿心莲片中的有效成份脱水穿心莲内酯进行了分离。 2 实验部分 2. 1 仪器和试剂 HPE100 高效毛细管电泳仪（美国 Bio-Rad 公司）, 配备 Chrom Perfect Version 2 色谱工 作站(美国 Justice Innovations 公司) ， XW-80A 涡旋混合器（江苏海门市麒麟医用仪器厂）， DL-180A 超声波清洗器（上海之信仪器有限公司），石英毛细管（75 μm i.d., 375 μm o.d., 河 北永年锐沣色谱器件有限公司），Constametric 4100 液相色谱泵 （美国LDC