人工合成氯霉素抗原免疫血清效价的比较及多克隆抗体的制备.pdfVIP

中国难学通提 2010，26(6)：43—46 ChineseAgriculturalScienceBulletin 人工合成氯霉素抗原免疫血清效价的 比较及多克隆抗体的制备 张红星，韩景丽，陈静文，黄漫青，张馨如 (北京农学院食品科学系，北京 102206) 摘 要：研【究目的】人工合成氯霉素抗原及氯霉素多克隆抗体的制备，比较氯霉素人工抗原免疫血清效 价。【方法】采用重氮化法，分别以BSA、OVA为载体蛋 白合成CAP．BSA，CAP—OVA两种完全抗原，并对 两种合成抗原的免疫效果进行比较。分别以这两种抗原作为免疫抗原用弗氏佐剂乳化后免疫新西兰大 白兔，免疫四次后，心脏采血，分离血清，再用两种抗原分别作为包被原对兔血清进行间接竞争ELISA 分析。【结果】大白兔经免疫后产生了抗氯霉素特异性抗体，两种抗原得到的抗体效价均达到1：8100，氯 霉素最低检出限为9ng／mL。【结论】综合比较认为，CAP．OVA作为免疫原，CAP—BSA用作包被原是比较 理想的实验方案，可用于制备氯霉素抗体和研制生产氯霉素酶联免疫试剂盒。 关键词：氯霉素；多克隆抗体；ELISA 中图分类号：S3 文献标志码 ：A 论文编号：2009．2228 ComparisonofTiterofAnti—serafrom CAP—BSA．CAP—oVAand PreparationofthePolyclonalAntibodyagainstChloramphenicol ZhangHongxing，HanJingli，ChenJingwen，HuangManqing，ZhangXinru (DepartmentofFoodScience,BeijingUniversityofAgricuhure,Beijing102206) Abstract：[OBJECTIVE]SynthesisofCAP—BSA，CAP-OVA，polyclonalantibodyagainstchloramphenieol， andcomparisonoftiterofanti—serafrom CAP—BSA，CAP—OVA．[METHOD]Bovineserum albumin(BSA) andOvalbumin(OVA)wereusedasproteincarriesrespectivelytocouplewithchloramphenicol(CAP)by diazotizationmethod，thencomparedtheimmuneabilityofthetwosyntheticantigens．Thetwosynthesized antigensCAP—BSAandCAP一0VAweremixedwiththesameamountofadjuvantandthenimmunizedrabbits． Afterthefourthimmunization。therabbitswerebloodedfrom heart。andthenseparatedbloodsera；lastlywe issuedindirectcompetitiveELISA analysisusingthetwoantigensascoatingenrespectively．[RESULTS] Enzymelinkedimmuno-sorbentassay(ELISA)indicatestheexistenceofspecificantibodiesintheanti—sera． Thetiterofanti—seraforCAP—BSA andCAP—OVA is1：8100．Thedetection limitofrCAPwas9ng／mL． 【CONCLUSION 】Aftercomparisonoftheresultscomprehensively，webelievedthatusingCAP—OVA as immunogenandCAP-BSA a