冷冻食品中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定.pdfVIP

中国动物检疫 2010年第 27卷第 3期 ——54．— 冷冻食品中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定 杨 松，刘永华，曲祖乙 (辽宁医学院动物医学院，辽宁锦州 121001) 摘 要：随机从锦州市的超市中采集速冻食品，通过细菌的增菌、分离纯化、生化鉴定确定是单核细胞增生性李 斯特菌。通过细菌的血清学鉴定确定其血清分型。通过本研究了解单增李斯特菌在速冻食品中的污染情况，为防治 疾病提供依据 。 关键词：单核细胞增生性李斯特菌；分离鉴定；动物性食品 ’ 中图分类号：$852．61 文献标识码：B 文章编号：1005—944X(2010)03～0054—02 单核细胞增多性李斯特菌 (Lis- 型血清购 白日本力生研株式会社。 颜色变化。 teriamonocytogenes，Lm)，简称单 1．2 方法 1．2．7 APIListeria鉴定试验 用 增李斯特菌，广泛存在于土壤、动物 1．2．1 增菌 在无菌操作台上，称取 纯培养 的菌落做 APIListeria 实 和水产品中，主要通过乳及乳制品、 25克样品，剪碎，用灭菌的镊子将其 验，按照APIListeria的操作说明 蔬菜、水产品、肉制品等食物传播。因 装入含有 225mL的FB1增菌液中，放 书进行操作。 其具有独特的生理特性，能引起人类 入 30℃±1℃的恒温培养箱中，培养 1．2．8 血清学鉴定 参照单增李斯 脑膜炎、败血症等疾患，尤 以妊娠期 25h±lh，吸取 lmL，加入 10mLFB2增 特菌诊断血清使用说 明书进行，0抗 妇女、新生儿以及免疫功能低下的病 菌液中放 30±1℃二次增菌25±lh。 原采用玻片凝集法，H抗原采用试管 人更易感染，致死率达 30％以上 。一 1．2．2 分离培养 用接种环 沾取 凝集法。 直以来 ，食品安全法规规定单增李斯 FB2培养液 ，在科玛嘉李斯特显色培 2 结果 特菌在食品中不得检出[1]，可是食品 养基上划线接种。置37~C恒温培养箱 2一 培养情况及菌落特征 FBl、FB2 加工环境 中的单增李斯特菌却很难 培养24±2h。 增菌液变浑浊，颜色 由原来的黄色 根除，所以国际食品微生物标准委员 1．2．3 染色镜检 挑取单个菌落的 变成黑色；在科玛嘉李斯特菌显色培 会 (ICMSF)规定非易感人群的每克食 一 半进行革兰氏染色，在光学显微镜 养基平板上形成兰色带有白色晕环 物 中单增李斯特菌 的含量不超过 下观察细菌的形态及染色特点。 的圆形菌落，大小为 2～3IrIIIl；在血平 IOOCFU~l。近几年来，因食品污染单增 1．2．4 纯培养 挑取科玛嘉李斯特 板上可见狭窄、透明的 B溶血环。 李斯特菌而导致的食物中毒事件 日 显色培养基上可疑菌落在血平板上 2．2 形态特征 革兰 氏阴性短杆菌， 渐增多，已引起不少 国家 的广泛关 划线培养，观察生长情况。 大 小 为 (O．4～0．5um)×(0．5～ 注。该菌已被列为二十世纪90年代 1．2．5 运动性镜检 运动性镜检挑 2．0tim)，两端钝圆，多单在，有 的呈V 四大食品致病菌之一，成为许多国家 取血平板上典型的菌落于洁净载玻 字型排列。 食品卫生的必检项 目。在我国，虽然 片上，用 0．85％灭菌生理盐水制成悬 2．3 典型运动镜检 油镜观察可见 由单增李斯特菌 引起 的食物中毒事 浮液，压上盖玻片，于显微镜下用油 明显的旋转翻滚运动。 件较少，但是应提高对该菌的重视， 镜观察。 2．4 生化试验 过氧化氢实验 阳 加强对单增李斯特菌的监测管理。本 1．2．6 生化试验 性、动力试验阳性、氧化酶试验阴性。 文作者对市售速冻饺子、肉排类冷冻 1．2．6．1 过氧化氢酶试验 挑取 2．5 API Listeria 鉴 定 试 验 食品进行 LM的检验，现将结果报告 血平板上纯培养的菌落于洁净玻片 18~24小时后，反应结果为D一木糖 如下 。