红色素产生菌RZ21菌株的原生质体紫外诱变育种研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgn．Sci．2010，38(6)：2780—2782，2792 责任编辑 王淼 责任校对 卢瑶 红色素产生菌 RZ21菌株的原生质体紫外诱变育种研究 夏顺翔，张魁，贾秉晟，杨启银，薛建 (南京师范大学生命科学学院，南京微生物工程技术研究中心，江苏南京2l0046) 摘要 [目的]对红色素生产茵RZ21菌株的原生质体进行紫外诱变育种，以提高其红色素的产量。[方法]以粘质沙雷氏茵为供试菌 种，研究其原生质的制备、再生的条件和该茵的原生质紫外诱变对红色素产量的影响。[结果]RZ21菌株 以溶茵酶8mg／ml，37℃作用 30min后，再加0．01mol／L(终浓度)的EDTA作用20rain，原生质体形成率达81．9％，再生率达31．5％。该菌原生质体经紫外诱变原生 质体处理及抗性平板、摇瓶两步筛选后 ，得到1株高产株RZ21—3，灵茵红素产量达到了0．813g／L，比原始菌株提高了24．9％。[结论]溶 茵酶8mg／ml，37℃作用30min后 ，再加0．O1mol／L(终浓度)的EDTA作用20min为该茵原生体制备的最佳工作条件。 关键词 原生质体 ；紫外诱变；灵菌红素；发酵 中图分类号 S182 文献标识码 A 文章编号 0517—66ll(2010)06—02780—03 Studyon theUV M utagenes~ BreedingofProtoplastinProdig【iosinProduDingBacteriaRZ21 XIAShun-xjangetal (NanjingEngineeringandTechnologyResearchCenterforMicrobiology，SchoolofLifeSciences，Nanjing，Jiangsu 210046) Abstract [Objective]TheaimismakeUVmutagenesisbreedingoftheprotoplastofhaematochromeproducingbacteriaR721，inordertoin— creasetheoutputofprodigiosin．[Method]WithS．marcescensRZ-21asthetestedstrain，theconditionsofproducing，regeneratingprodigio— sinandtheeffectofUVinducementontheprodigiosinwerestudied．[Result]Theproductionrateofprotoplastwas81．9％andregeneration ratewas31．5％，undertheconditionsofinteractingRZ一21withlysozyme(8mg／ml，37℃)for30min，theninteractingitwithEDTA(0．01 molfL)ofr20min．Themutantwithhighproductionofprodigiosin，RZ21—3，wasscreenedbyUVnmtagenesis，streptomycin—resistantflat- panelscreeningandre-selectedby shakingfermentation．Theproduction ofprodigiosin ofR72 1-3 in flask femr entationwas0．813g／L， 24．9％higherthantheparentstrain．[Conclusion]TheoptimizedmethodofproducingandregeneratingprodigiosinofRZ-21isinteracting RZ-21withlysozyme(8mg／ml，37℃)ofr30min，theninteractingitwithEDTA (0．o1mol／L)for20min． Keywords Protoplast；UVmutagenesis；Prodigiosin；Femr entation 粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)亦称灵杆菌 ，是革兰 统的诱变选育和抗性筛选，以期能筛选到产红色素的高产 氏阴性兼性厌氧杆菌，属于肠杆菌科 (Enterobacteriaceae)沙 菌株。 雷氏菌属，约半数菌株能产生红色素(prodigiosin)。试验所用