结核杆菌抗原85A与GM-CSF诱发抗鼠黑色素瘤效应研究.pdfVIP

大 东 南 学学 uth JSSooutheeaassttUUnniivv嚣(Med医Scc学iEE版ddi)；2…ol0，F一eb；29(1)一．57-6～l 5·7· 结核杆菌抗原 85A与 GM—CSF诱发 抗鼠黑色素瘤效应研究 刘春生，吴昀，窦骏，文萍，赵枫姝，唐权，李金龙，王亚琴 (东南大学基础医学院 微生物学与免疫学系，江苏 南京 210009) [摘要]目的：用结核杆菌抗原85A(Ag85A)和细胞因子GM—CSF，作为异种抗原及免疫增强剂，研究其在 鼠 体 内能否有效地诱导抗黑色素瘤免疫应答。方法：用分子生物学法构建重组质粒pRSC-Ag85A／GM-CSF，通 过细胞转染获得稳定表达Ag85A和GM—CSF的B16黑色素瘤细胞。48只C57BL／6小鼠随机均分为B16细 胞组 、B16一pRSC细胞组 、B16-Ag85A细胞组和 B16一Ag85A／GM—CSF细胞组 ，分别将上述不同B16细胞经背 部皮下接种小鼠。通过观察其致瘤性的强弱、荷瘤鼠生存时间、鼠血清IFN ‘水平以及CTL、NK细胞杀伤活 性，分析Ag85A和GM—CSF在抗肿瘤免疫效应中作用。结果：B16一Ag85A／GM—CSF细胞组小鼠肿瘤生长明 显受到抑制，生存时间较对照组平均延长40％，血清IFN— 分泌较对照组高 1倍，CTL、NK细胞杀伤活性与 其他各组相比也有较大的提高。结论：接种稳定表达 Ag85A和GM—CSF的B16细胞能降低对小鼠的致瘤 性，诱导有效的抗肿瘤效应。 [关键词]结核杆菌抗原85A；粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子；致瘤性；免疫佐剂 [中图分类号]R739．5 [文献标识码]A [文章编号]1671。6264(2010)010‘057—05 doi：10．3969／j．issn．1671。6264．2010．01．012 Studyofantim‘elanomaeffectinmiceinjectedwithmelanomacellstransfected withtherecombinantexpressingAg85A andGM_CSF LIUChun。sheng，WUYun，DOUJun，WENPing，ZHAO Feng‘shu，TANG Quan， LIJin。long，WANG Ya。qin (DepartmentofPathogenicBiologyandImmunology，SchoolofBasciMedcialScience，SoutheastUniversity，Nanjing210009，China) [Abstract]Objective：Tostudyanti—melanomaeffectinmiceinjectedwithmelanomacellsexpressingMycobacte- riumtuberculosisantigen85A(Ag85A)andGM—CSFasheterogeneityantigenandimmunoadjuVants．Methods： TherecombinantpRSC_。Ag85A／GM 。CSFwasconstructedbythemolecularbiologicaltechnologyandwastransfect-- edintothemelanomaB16cellsandthetranscriptionofAg85A andGM ‘CSFinB16cellswasrespectivelydetected byRT—PCR．Thedifferentgene—modifiedB16cellswereinjectedintoC57BL／6miceandthetumorigenicitywas analyzedbymeasuringthesizeoftumorandobservingthesurvivaloftumor—bearingmice．Meanwhile，theanti— tumorimmuneresponseinducedbytheAg85A andGM ‘CSFwasevaluatedbydetectingtheactivitiesofCTL and [收稿日期]2009·09—03 [修回日期]2009—10—09 [基金项 目]江苏省自然科学基金重点项 目(BK2007710) [作者简介]刘春生(1979一)，男，安徽安庆人，硕士研究生。E—mail：lx121516@sohu．com [通讯作者]窦骏E—mail：njdouj