真菌多糖化学研究.pdfVIP

第 17 卷 第 3 期 龙岩师专学报 Vol. 17 No . 3 1999 年 8 月 J o ur nal of Lo n gyan Teachers Colle ge Au gust , 1999 ( ) 文章编号 : 1003 - 871X 1999 03 - 0055 - 03 真菌多糖化学研究* 邱龙新 摘要 : 论述 目前在真菌多糖化学研究中常用的提取 , 分离纯化方法 , 对多糖结构进行研究的方法 , 以 及 目前研究中真菌多糖的结构与抗肿瘤作用的可能联系 ,抗肿瘤的机理 。 关 键 词 :真菌多糖 ;多糖结构 ;抗肿瘤作用 ;抑瘤机理 中图分类号 :Q 93 - 936 文献识别码 :A 植物 , 细菌 , 真菌的某些种类中含有可提高机体免疫力 , 具抑瘤活性的多糖 , 对此类多糖的研究已深入开 展 。目前 ,越来越多的研究报道 , 从多种真菌提取 、纯化出了此类性质的多糖 , 从香菇 、灵芝等真菌中提取的多 糖已制成商品 ,作为抗肿瘤药物 。由于真菌资源广泛 ,对真菌多糖的研究已引起了广泛的重视 。本文就真菌多 糖的提取 、分离纯化方法 、结构研究方法 、结构与抑瘤作用关系 、抑瘤机理等方面扼要介绍如下 : 1 多糖提取 ,分离纯化方法 : 真菌多糖一般为水可溶性或水不溶性 。水可溶性的多糖可采用热水浸提 , 时间 , 重复次数视不同真菌而 定 。水不溶性多糖一般用酸或碱提取 ,常用三氯乙酸 、稀盐酸 、草酸铵 、氢氧化钠等 。用碱提取时 ,为防止多糖降 解 ,常加入硼氢化钠或硼氢化钾 。目前 ,提取真菌多糖时一般先用 100 ℃热水浸提 ,浸提出热水可溶性部分 ,然 后残渣继续用酸 、碱处理 。在提取多糖之前 ,可用酶 ,超声波或低温冻融等方法使细胞破碎 ,然后加入乙醇等有 机溶剂以除去材料中的脂类物质并减少多糖降解 。提取液经离心或过滤 , 减压浓缩后 , 加入乙醇可使多糖沉 淀 ,有时不同浓度的乙醇可沉淀出不同组分的多糖 。沉淀相继经乙醇 、丙酮 、乙醚洗涤 ,或经流水透析再冷冻干 燥便可得到多糖粗制品 ,一般需研究多糖抑瘤活性时以流水透析再冷冻干燥为好 。 ① 多糖制品若需除去蛋白质 ,可用 Seva g 法 除去 。多糖粗制品顺序经 D EA E 纤维素柱层析 ,凝胶过滤 , 吸 附层析便可分离出各种组分的纯多糖 。 2 结构的研究方法 : 在对多糖化学结构进行研究时 ,首先要知道组成单糖残基的种类 、比例 。可用纸层析 、薄层层析 、气相色谱 α 法 、高效液相色谱法等方法测定 。然后需判断糖苷键位置 ,糖环结构 ,组成单糖残基顺序 、糖类 、异构体类型 β ② α 等 。目前核磁共振法 应用较为广泛 ,可以在不破坏多糖结构的基础上同时测定 、异构体类型、糖苷键位置 、 β 单糖残基顺序等 。另外可用甲基化分析结合气相色谱法及质谱仪测定糖苷键位置 ;用甲基化分析 ,高碘酸盐氧 化作用 , 乙酰解 、甲醇解 、酸水解 、酶水解 、降解等各种方法结合色谱法测定单糖残基顺序 ; 用甲基化 、部分酸水 解 、乙基化等步骤处理多糖 , 再用高效液相色谱法分离鉴定糖环结构类型 , 也可依电离方法用质谱仪法直接分 α 析烷基化寡聚糖来决定糖环结构类型 ;用异构酶水解 、红外光谱法可确定 、异构体类型 。