CD137L基因转染对小鼠体内卵巢癌细胞生长的影响及其免疫调节研究.pdfVIP

维普资讯 现代妇产科进展 2007年 l2月第 l6卷第 l2期 ProgObstetGynecol。Dec．2007．Vo1．16．No．12 · 论著 · CD137L基因转染对小鼠体 内卵巢癌细胞 生长的影响及其免疫调节研究 王 妍 ，崔保霞 ，马道新。，杨兴升 (山东大学齐鲁医院1．妇产科 ；2．肿瘤 中心实验室，济南 250012) 【摘要 】 目的：初步探讨转染CD137L基因的小鼠卵巢癌细胞株 OVHM细胞体 内的 致瘤性及其对免疫功能的影响。方法 ：以脂质体为载体将重组质粒 peDNA3．1和 pcD． NA3．1／CD137LL分别导入 OVHM细胞 中，经HygroB筛选 ，用 RTP·CR法检测 目的基因的 表达，筛选建立高表达的细胞株。计数法绘制体外培养细胞生长曲线。将转染前后的肿 瘤细胞，分别接种于 B6C3F1小鼠的腹部皮下观察其致瘤性。LDH法测定其 CI’L细胞的 杀伤活性。结果：与野生型OVHM细胞相 比，所建立的OVHM／CD137L细胞株可高表达 CD137L。转染前后肿瘤细胞的体外生长速度无明显变化。OVHM／CD137L细胞在小鼠 体 内的致瘤性较 OVHM／peDNA3．1细胞和野生型 OVHM 细胞明显 降低。接种 OVHM／ CD137L细胞小鼠的CTL细胞杀伤活性 明显增 强。结论 ：转染 CD137L基 因后 OVHM 细 胞在小鼠体 内的致瘤性显著降低 ，且诱导产生了明显的抗肿瘤免疫。CD137L有望成为 卵巢癌基因治疗的候选基 因。 【关键词】 卵巢肿瘤；肿瘤坏死因子；基因转染；肿瘤免疫 中图分类号：R737．33 文献标识码 ：A 文章编号：1004—7379(2007)12—0898—04 EffectofCD137L genetransfection on growth ofovarian cancercellsand itsinlnlune regulationinviVO．WangYah．CuBaoxia。MaDaoxln，eta1．1．Departmentof0bstetricsand Gynecology；2．DepartmentofChemotherapy，CentralLaboratory，QiluHospital，ShandongUniver— sity． ，n 25o012 【Abstract】 objective：T0observetheeffeetofCD137Lgenetransfectiononmouse0一 variancancercellgrowthanditsimmuneregulation．M ethods：Mouseovariancancercelllines (OVHM)weretransfectedwithpeDNA3．1andpcDNA3．1／CD137L throughLipofeetami— neTM2O00mediation．TheexpressionofCD137L genewasdetectedbyRT—PCR andthehigh expressioncellstrainwasselected，Th egrowthcurvewasdrawnbycountingthenumberofthe tumorcells．ThetumorsizewasobservedafterVHM ／CD137L cells．OVHM ／pcDNA3．1cells nadparental0VHMcellswereinjectedsubcutaneouslyintoB6C3F1mouse．TheactivityofCTL from thespleenofimmunizedmousewasdetectedwithlactatedehydrogenase (LDH)method usingpraentalOVHM cellasthetragetcells．Results：Compraedwiththeothertwogroups，hte expressionofCD137LmRNA inOVHM ／CD137Lcellsincreasedmarkedly．Therewas