对GBT23377-2009食品中脱氢乙酸的测定高效液相色谱法中计算公式的重新解释.docVIP

对GB/T23377-2009食品中脱氢乙酸的测定 高效液相色谱法中计算公式的重新解释 摘要 GB/T23377-2009食品中脱氢乙酸的测定 高效液相色谱法中最后关于计算脱氢乙酸的含量的计算公式理解起来容易引起误解，本文根据标准中测定脱氢乙酸的过程，重新对计算公式进行了推导和解读，并建议计算公式应该符合标准中脱氢乙酸的处理及检测过程，不要将公式简化，以便于按照标准进行检测的人员更易于理解。 关键词 脱氢乙酸 计算公式 在GB/T23377-2009 食品中脱氢乙酸的测定 高效液相色谱法[1]中关于脱氢乙酸含量的计算公式如下： （C1-C0）×V×10-3×f X= m 关于公式中字母意义的解释标准中是这样描述的： X——样品中脱氢乙酸的含量，单位为克每千克（g/kg）; C1——由标准曲线查得试样溶液中脱氢乙酸的浓度，单位为毫克每升（mg/l）; C0——由标准曲线查得空白试样溶液中脱氢乙酸的浓度，单位为毫克每升（mg/l）; V——试样溶液总体积，单位为毫升（ml）； f——过固相萃取柱换算系数（f=0.5）; m——样品质量，单位为克（g） 首先笔者阐述一下这个解释中容易让人产生误解的两个地方： 第一 关于V的解释 在样品处理过程中，特别是用固相萃取柱萃取脱氢乙酸时涉及到两个定容体积，一处是称取样品置于50ml容量瓶中，加水，用氢氧化钠调pH值7~8，然后用水稀释至刻度，即第一次定容，体积为50ml；二处是取离心上清液20ml用甲酸调pH值4~6，然后定容到25ml，即第二次定容。经过试验，如果完全按照标准中规定的要求来完成实验，则此处的体积V就是第一次定容的体积，即50ml。但是如果不完全按照标准中规定要求来完成实验，则此公式的体积V就不是50ml了,即V也就不是标准中所解释的试样溶液总体积了。 第二 关于f的解释 关于f，标准中解释为过固相萃取柱换算系数，且f=0.5，这个解释容易让检测者误解，如果在样品处理过程中用固相萃取柱对脱氢乙酸进行萃取，计算中就要乘以这个换算系数，如果不用固相萃取柱，计算时就不用乘以这个换算系数。而标准的6.1.2条款中，样品处理就没有用固相萃取柱进行处理，而是用离心后的上清液过0.45μm滤膜，供高效液相色谱直接测定，如按照此处理过程，标准中给出的计算脱氢乙酸的公式就不成立了。所以笔者认为对f的解释是不合理的。 其次我们通过对标准的详细研读和试验，对脱氢乙酸如何计算进行推导。 我们通过试验，且完全按照标准中规定要求来完成试验，脱氢乙酸的计算公式应该是如下的： （C1-C0）×2 X= ×1000 m×20/50×5/25×1000×1000 公式中的“2”为收集的洗脱液的体积，“20”为离心后取上清液的体积，“50”为样品第一次定容时的体积，“5”是过固相萃取柱时所取的试样的体积，“25”是取上清液后第二次定容的体积。 通过推导化简公式可变为 （C1-C0）×50×10-3×0.5 X= m 即也就是标准中给出的公式 （C1-C0）×V×10-3×f X= m f就是过固相萃取柱换算系数，且f=0.5，V为试样溶液总体积，50ml。 可笔者通过做大量的试验证实，如果按照标准中给出的只用2ml70%的甲醇溶液来洗脱固相萃取柱，收集2ml洗脱液来测定脱氢乙酸的含量，与不用固相萃取柱萃取，直接用离心过的上清液过0.45μm的滤膜上机进行检测的结果进行比较，过固相萃取柱测定的结果远小于直接用离心过的上清液过0.45μm滤膜的检测结果，这说明2ml70%的甲醇溶液不能够将脱氢乙酸从固相萃取柱中完全洗脱出来。通过多次的试验证实要将固相萃取柱里的脱氢乙酸完全洗脱下来，得用6ml70%的甲醇溶液分3次进行洗脱，每次2ml。如果按照此操作，标准中给出的计算脱氢乙酸含量的公式就不对了，计算公式就应该为： （C1-C0）×V X= m×20/50×5/25×1000 则公式中V为收集的洗脱液的体积，也就不存在f，即过固相萃取柱换算系数。这个公式更易于操作者的理解，与标准中脱氢乙酸的处理和检测过程更相符。 以上只是笔者对标准的一点粗浅的见解，有不