黄荆子乙酸乙酯提取物对人宫颈癌Hela细胞生长抑制及诱导凋亡作用实验研究.pdfVIP

黄荆子乙酸乙酯提取物对人宫颈癌Hela 细胞生长抑制及诱导凋亡作用的实验研究 研究生：薛玉珍 导师：陈忠东教授 中文摘要 Bax、Caspase．3蛋白表达有关。 方法：体外培养人宫颈癌Hela细胞，设EVn．50 实验组，并设对照组为：空白对照组(加入完全培养基)、溶媒对照组(加入终 用台盼兰染色细胞计数法、平皿集落形成法及软琼脂集落形成法检测EVn一50对 结果：台盼兰染色细胞计数法结果显示：EVn．50 1．0、lO．0、100．0p,g／mL各 组及Tax EVn一50各组中，仅EVn一50 100．099／mL组与Tax5rtg／mL组对Hela细胞生长抑 细胞群体倍增时间延长，由正常的24小时延长至37小时。平皿集落形成法结果 显示：EVn一50 1．0、10．0、100．099／mL各组及Tax 599／mL组分别处理Hela细胞 成法结果显示：EVn-50 1．O、lO．0、100．0rtg／mL各组及Tax5p,g／mL组分别处理 5 中，仅100．0rtg／mL浓度的EVn-50与Tax5pg／mL组对Hela细胞集落形成能力 核碎裂和凋亡小体形成；EvIl·50 1．0、10．0、100．0}tg／mL各组及Tax5}tg／mL组分 各组中，仅EVn-50 100．0rtg／mL组与Tax51．tg／mL组的凋亡率接近，经比较差异 无显著性(PO．05)。DNA凝胶电泳结果显示：EVn．50各组及Tax 599／mL组分 别作用Hela细胞48h后，仅在EVn-50 100．0p,g／mL组与Tax5rtg／mL组出现典型 “DNA Ladder”条带。PI染色FCM结果显示：EVn一50 1．0、10．0、100．0I_tg／mL 各组及Tax 亡，呈浓度依赖性；在EVn一50各组中，仅EVn一50 5I．tg／mL 100．0rtg／rrm组与Tax 组的凋亡率接近，经比较差异无显著性(P0．05)。间接免疫荧光FCM结果显 逐渐升高，细胞中Bcl一2蛋白表达逐渐降低。 结论：1)Evn．50抑制体外培养入宫颈癌Hela细胞生长，呈浓度依赖性； 2)Elm．50具有诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡作用，呈浓度依赖性； 诱导凋亡作用与紫杉醇相似； Caspase．3蛋白表达及下调细胞中Bcl．2蛋白表达有关。 关键词黄荆子乙酸乙酯提取物；宫颈癌；Hela细胞；生长抑制：凋亡 6 TheeffectoftheacetoacetateextracteofVitex seed on negundo inhibitionandinduced ofthehumancervical growth apoptosis carcinomaeel