基于理性设计的_甘露聚糖酶底物亲和力的定向改造_魏喜换1_王春娟1_赵梅1_李剑.pdfVIP

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2017-08-28 发布于安徽
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基于理性设计的_甘露聚糖酶底物亲和力的定向改造_魏喜换1_王春娟1_赵梅1_李剑.pdf

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浙江大学学报农业与生命科学版 401 58~64 2014 JournalofZheian Universit A ric LifeSci j g y g htt www ournals zu edu cn ar p j j g E-mail zdxbnsb@zu edu cn DOI 10 3785 issn 1008-9209 2013 06 011 j j 基于理性设计的甘露聚糖酶底物亲和力的定向改造 - β 1 1 1 1 2* 魏喜换王春娟赵梅李剑芳邬敏辰江南大学食品学院江苏无锡江南大学无锡医学院江苏无锡 1 214122 2 214122 摘要以宇佐美曲霉的家族甘露聚糖酶为研究对象对其底物亲 AserillususamiiYL-01-78 5 - AuMan5A p g β 和力的定向改造进行理性设计及定点突变以获取米氏常数值较低的突变酶 Y111F 首先采用同源建模 Km AuMan5A 和分子对接模拟等方法预测与甘露二糖对接复合物的空间结构在此结构上使用软件统计到距 AuMan5A PMol y 、甘露二糖以内的个氨基酸位点其次对不同来源的与一级结构序列全同率大于的甘露 8Å 38 AuMan5A 50% - β 聚糖酶进行多序列比对排除个保守氨基酸位点依据个非保守位点上的氨基酸性质及其所处空间位置选 21 17 111 206 243 择中的、和作为拟突变氨基酸将它们分别替换为性质相似的或在其他甘露聚糖 AuMan5