利用慢病毒载体系统构建稳定表达癌基因PIN1的鼻咽上皮细胞株.pdfVIP

利用慢病毒载体系统构建稳定表达癌基因PIN1的鼻咽上皮细胞株.pdf

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37 6 第 卷 第 期 遵 义 医 学 院 学 报 Vol. 37 No. 6 20 14 12 年 月 Journal of Zunyi Medical University Dec. 20 14 临床医学研究 利用慢病毒载体系统构建稳定表达癌基因 PIN1 的鼻咽上皮 * 细胞株 1 2 ,4 ,5 3 ,4 5 , , , 李五一 徐 萌 刘建国 罗国炜 (1. , 519125 ;2 . , 51904 1 ;3. 遵义医学院附属第五医院口腔科 广东珠海 遵义医学院珠海校区口腔系 广东珠海 遵义医 , 563099 ;4 , 563099 ;5 . 学院口腔学院 贵州遵义 贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室 贵州遵义 香港中文大 , , , 999077) 学病理解剖及细胞学系 威尔斯亲王医院 华南国家肿瘤重点实验室 香港 [ ] PIN1 , 摘 要 目的 利用慢病毒载体系统构建稳定表达癌基因肽脯氨酰异构酶 的鼻咽上皮细胞株 用于后续生物学功能 。 pCDH - PIN1 Lipofectamine 293TN , PIN1 方面研究 方法 将病毒载体 用 转染到 细胞 收集含有 病毒颗粒的培养液加入 NP69 。 GFP 、RT - qPCR、Westernblot PIN1 。 细胞进行培养 荧光显微镜观察慢病毒载体 发光率 验证 的表达情况 结果 荧光 PIN1 94 % ± 2 . 09% NP69 , 。RT - qPCR、Westernblot NP69 显微镜观察发现 基因已整合到 的 细胞中 转染效果稳定 检测发现 - PIN1 PIN1 mRNA

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