实时荧光定量PCR检测ESBLs基因型方法的研究.pdfVIP

天津医药2009年lO月第37卷第10期 839 实时荧光定量PCR检测ESBLs基因型方法的研究 刘蕊穆小燕刘慧敏樊琳王晨 GREEN 摘要目的：建立一种快速检测革兰阴性杆菌产超广谱B内酰胺酶(ESBLs)耐药基因分型的SYBRI实 法对5l株表型阴性的多重耐药的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌进行ESBLs耐药基因检测，并与改良i维实验进行对 因型并经测序证实。线性检测范围3x103。3x10s拷贝／mL，r=-0．9947；批间重复性试验变异系数(CV)为9．6％。荧光 I实时荧光定 定量PCR方法与改良三维实验方法比较差异无统计学意义(r=1．125，PO．05)。结论：SYBRGREEN 量PCR检测ESBLs的耐药基因具有特异性强、灵敏度高、快速、简便的特点，适于临床监测革兰阴性杆菌产ESBLs基 因型。 关键词聚合酶链反应B内酰胺酶类基因型抗药性，多药革兰氏阴性菌 for Extended Real-timeFluorescenceQuantitativePCRDetecting Spectrum-13-LactamasesGenotype LIU Chen Rui，MU Huimin，FANLin，WANG Xiaoyan，LIU UionMedicine Tianjin Center,Tianjin300121，China Abstract establisha methodtodetect ofextended genotypes spectrum—B— Objective：To rapid drug-resistance bacillusthereal-timefluorescence PCR．Methods： Lactamases(ESBLs)producedbygramnegative using quantitative toclinicalcommon of andtheir of ESBLs，SHV，TEM，CTX—M，OXAhomology，9pairsspeciepfimem According genotypes OXA一10．Toextract were and SHV，TEM，CTX—M一1，CTX—M一2，CTX—M一8，CTX—M一9，OXA-1，OXA-2 designedincluding 1 real—time PCR DNA thenestablishand SYBRGR