胰腺癌多药耐药细胞株BxPC-3-ADM的建立及耐药机制的初步探讨.pdfVIP

·835· ±堡壁里丛塾蓥查!!!!至!!旦笙!!鲞箜!!塑堡垒i垒』旦!里!!!!i!堕!z塾堡!型竺!!璺!竺!!!!：∑型：!!：盟!：!! 实验研究 胰腺癌多药耐药细胞株BxPC一3／ADM的 建立及耐药机制的初步探讨 蒋永剑 虞先浚徐近 李骥 傅德良倪泉兴 【摘要】 目的 构建胰腺癌多药耐药细胞株BxPC一3／ADM，通过动态监测诱导耐药过程，探讨 其耐药的可能机制。方法 逐步增加阿霉素浓度对BxPC-3细胞进行诱导，在不同的阿霉素诱导浓 度，MTT法检测细胞对多种化疗药物的耐药指数，RT—PCR和Western印迹法检测细胞MDRl和 MRP mRNA和蛋白的表达。结果 成功构建多药耐药细胞株BxPC一3／ADM；在0．05pg／ml至 8pg／ml阿霉素诱导浓度，细胞对5-Fu、MMC和Gem的耐药指数无明显增加；在16弘g／ml浓度3种 化疗药物的耐药指数有较明显上升。同时伴有MDRlmRNA表达的明显增加；至32肛g／ml5-Fu和 Gem的耐药指数未再有继续上升，而MMC的耐药指数则继续上升，同时MDRlmRNA表达未再增 加，而MRP mRNA表达则明最增加。Western印迹实验显示MDRl和MRP蛋白表达变化与mRNA 表达变化趋势一致。结论 MDRl基因在诱导早期的耐药中起主导作用，在后期则和MRP基因协 同发挥作用。 MRP 【关键词】胰腺肿瘤； 多药耐药； MDRl； Constructionof resistanteelIline of cancerandinitiaI of BxPC-3／ADM multidrug pancreatic investigation itsresistancemechanism JJANG a1．PancreaticDiseaseInsti— yong-jian，yL，Xian-jun，XUJin，et tution，Huashan 200040，P．R．China HOSpital，FudanUniversity，Shanghai Toconstruct resistanceeelllineBxPC一3／ADMof [Abstract]0bjectivemuhidrug pancreatic cancerand itsresistancemechanism the course． dynamicallymonitoring investigate through inducing MethodsBxI’C一3cellwasinduced theconcentrationofADM thedifferent byincreasing gradually．At ADM．theresistance concentrationsof indexesto weredetected inducing multiplechemotherapeutics MTT andthemRNAand ofMDRlandMRI’weredeterminedRT—PCRand by proteinexpression by Western