玻璃体腔注射尿激酶对大鼠视网膜血管内皮细胞间Occludin蛋白含量的影响.pdfVIP

Chin Fundus 中华眼底病杂忠2011年7月第27卷第4期J()cui Dis，July20ll，V01．27，No．4 383 ·短篇论著· 玻璃体腔注射尿激酶对大鼠视网膜血管内皮细胞间 0ccludin蛋白含量的影响 刘倩高永峰 【关键词】尿纤溶酶原激活物／药物作用； 血视网膜屏障； 动物实验 中图分类号：R774．1 临床研究证实玻璃体腔内注射溶栓药物治疗视网膜血管 阻塞性疾病可以硅著提高患者视力，减少全身用药引起的严重 色清晰切片5张，Leica 并发症[“，是一种安全有效的治疗方法∽]。溶栓药物穿过视网 观察结果，以血管内皮细胞膜晕棕黄色为阳性表达。每张切片 膜血管壁进入血管溶栓是璃体腔注射溶栓药物治疗视网膜血 随机选取视网膜动脉、静脉、毛细血管切面各2个进行观察。 P1us 管阻塞件疾病的前提。()ccludin蛋白是构成紧密连接的一种应用I．eicaIM50图像采集系统，Image_Pro6．o图像分析 重要的跨膜蛋白，可作为判断组织屏障功能和血管内皮细胞通 软件。测定平均吸光度[A，旧称光密度((，D)]值以表示阳性染 色的单位面积染色强度。平均A值越高，阳性染色强度越强， 透性改变的一个重要观察指标¨“]，通过Occludin蛋白观察溶栓 药物进入血管的过程中对视网膜血管通透性和If『L视网膜屏障的 表明()ccludin蛋白含量越高。5]。 1 作用和影响。因此我们将尿激酶注射到大鼠玻璃体腔内。观察 采用SPSS7．o统计分析软件进行统计学处理。数据均 以均数±标准差(；±s)表示，经检验数据资料符合正态分布和 视网膜m管内皮细胞间()ccludin蛋白含量的变化，以进一步观 察尿激酶对视网膜血管通透性的影响。现将结果报道如下。 的平均A值采用两个独立样本比较的f检验。统计学结果以 l材料和方法 口一O．05为检验水准，Po．05为差异有统计学意义。 无特定病原体的sprague_Dawley(SD)大鼠10只，体重 2结果 180～220 g，雌雄不限，鼠龄3个月。由河南省实验动物中心提 供。大鼠左眼作为实验眼，右眼作为对照眼。复方氯霉素滴眼 sP染色显示．实验组和对照组大鼠视网膜中所有血管均 液和复方托品酰胺滴眼液交替滴大鼠双眼。按50 可见黄色或棕黄色颗粒。内皮细胞核警椭圆形，细核内可见淡 mg／kg剂量 使用盐酸氯胺酮注射液2ml腹腔注射麻醉．用灭菌生理盐水冲 蓝色颗粒．内皮细胞膜和细胞浆可见黄色或棕黄色颗粒。毛细 血管管腔内多无染色颗粒。视网膜神经节细胞体较大。细胞膜 洗结膜囊。用盐酸丁卡闲滴眼液点眼行结膜表面麻醉。用lO扯I 微量进样器抽取混匀的尿激酶注射液4扯l，以颢卜方角巩膜缘 呈棕黄色．易于毛细血管混淆。但细胞浆中有淡蓝色颗粒。实 后约1mm处为进针点，以45。～50。的角度进入实验眼内．通过 瞳孑L直视针尖，当到达玻璃体腔中央部时缓慢注入药液，停留 约15s后拔针。用灭菌棉签压迫进针部位片刻。结膜囊内滴复 胞膜和细胞浆可见棕黄色颗粒。动脉管腔内多无染色颗粒。实 方氯霉素滴眼液，涂红霉素眼膏。对照眼则以同样方法注入磷 酸盐缓冲液(PBs)4扯l。 较弱，内皮细胞膜和细胞浆可见黄色颗粒。静脉管腔内町见红 24h后处死