滋阴活血方对糖尿病大鼠视网膜瘦素表达的影响.pdfVIP

2013V01．20No．3 ·243· 中国中医药科技2013年5月第20卷第3期May 滋阴活血方对糖尿病大鼠视网膜瘦素表达的影响 徐缨1 倪海祥2徐英英1史奎钧1 吴巧敏2 方 芳1 寿旗扬3 袁晓2△ (1浙江中医药大学附属第三医院·杭州3100052浙江中医药大学附属第一医院·杭州310006 3浙江中医药大学·杭州310053) 摘要 目的：观察滋阴活血方对糖尿病大鼠视网膜瘦素表达的影响。方法：SD大鼠尾静脉注射4．5％ 链脲佐菌素诱导糖尿病模型。实验分为正常组、模型对照组、多贝斯治疗组、滋阴活血方组，灌胃治疗6 周。取各组大鼠眼球组织，分别用免疫组织化学染色、免疫印迹方法检测各组大鼠眼球视网膜瘦素的表 达。结果：免疫组化检测结果显示：糖尿病模型组大鼠视网膜各层瘦素染色程度较正常组明显增加为中 度(++)，多贝斯治疗组和滋阴活血方治疗组的染色程度则为轻度(+)。免疫印迹结果显示：糖尿病大 鼠视网膜瘦素相对表迭量较正常组明显升高(P0．01)，而多贝斯对照组、滋阴活血方治疗组的表达量 较模型对照组明显下降(P0．01)。结论：滋阴活血方可降低糖尿病大鼠视网膜瘦素表达，对糖尿病视 网膜病变起到一定的改善作用。 主题词糖尿病视网膜病变／中医药疗法@滋阴活血方／治疗应用 大鼠 糖尿病视网膜病变(Diabetie Refinopmhy，DR)是糖尿病 微血管并发症中常见的严重并发症，是一种由于视网膜缺血 一枸橼酸钠缓冲液配成4．5％浓度，pH4．0)。3天后禁食12 诱导的眼底新生血管形成性病变，是目前主要的致盲原因之 小时以尿糖试纸检测尿糖，凡尿糖定性在+++～++++ 者，再以快速血糖仅鼠尾静脉取血测定随机血糖，凡血糖≥ 一。瘦素(Lepitin)是近年来日益受到重视的一种细胞因子， DR患者血清中瘦素水平与其病情的严重程度呈正相关，随 16．7mmol／L者，确定为糖尿病造模成功。将糖尿病大鼠继 着病情的发展，瘦素水平逐渐升高”。1。研究发现瘦素可促 续进行普通饲料喂养14周Mj，随机取30只已经有糖尿病并 进血管内皮细胞增生及迁徙，从而参与新生血管形成过 发背景期视网膜病变的大鼠进一步分组，随机分为模型对照 程㈡。j。因此，在DR初期，对视网膜瘦素表达的抑制可能 组、多贝斯治疗组、滋阴活血方治疗组，每组10只。同时取 是对DR治疗的一个潜在目标。 10只大鼠设为正常对照组，尾静脉注射等体积生理盐水，喂 滋阴活血方是浙江省名中医史奎钧治疗DR的经验方， 养相同时间，尿糖定性为阴性，血糖不升高。 本研究通过观察滋阴活血方对糖尿病大鼠视网膜瘦素表达 正常对照组、模型对照组：等剂量生理盐水灌胃；多贝斯 水平的影响，探讨其作用机制。 治疗组：多贝斯胶囊悬液(0．29／kg)灌胃；滋阴活血方组：滋 1材料与方法 阴活血方浓缩液(2．Oml／kg·d。1)灌胃；均每天给药1次，连 1．1动物雄性SPF级sD大鼠，体重150—1809，购自上 续给药6周。 海斯莱克实验动物有限公司，生产许可证：SCXK(沪)2008— 1．5观察指标及测定 0016。 1．5．1血糖测定快速血糖仪测定。 1．2 药物滋阴活血方由黄芪、川石斛、太子参、怀山药、生 1．5．2视网膜Leptin蛋白表达测定 地、丹参、杞子、丹皮、青葙子、谷精草、川芎、决明子等组成， 1-5．2．1免疫组化检测取大鼠左眼标本，取眼后节组织 水煎浓缩成29／ml，4。C储存，备用。多贝斯胶囊(羟苯磺酸 脱水、透明、浸蜡、制片。免疫组化观察。免疫染色程度分 钙胶囊)：西安利君制药有限公司，批号：