大黄及丹参注射液对实验性急性胰腺炎小鼠小肠隐凹素-4基因表达影响的研究.pdfVIP

· 34 · 中国中医药科技 2010年 1月第 17卷第 1期 Jan．2010Vo1．17No．1 大黄及丹参注射液对实验性急性胰腺炎小鼠 小肠隐凹素 一4基因表达影响的研究 赵金锋 刘世宾 罗 静 胡祖健 李 钢 (杭州市中医院 ·杭州310007 浙江中医药大学 ·杭州310053) 摘 要 目的：探讨大黄和丹参注射液治疗急性胰腺炎的作用机制。方法：采用雨蛙素和内毒素腹腔注 射复制小鼠急性胰腺炎模型。小鼠随机分组并给药处理。RT—PCR测定小鼠小肠隐凹素 一4mRNA表 达。结果：模型组小鼠小肠隐凹素一4mRNA表达较正常组明显降低，大黄组和大黄加丹参组较模型组小 肠隐凹素一4表达明显升高。结论：抑制隐凹素一4mRNA表达的降低可能是大黄和丹参注射液治疗急，l生 胰腺炎的作用机制之一。 主题词 胰腺炎，急性坏死性／中医药疗法 大黄／治疗应用 丹参注射液，治疗应用 小鼠 随着ICU的进步和早期液体复苏治疗，胰腺、胰周和后 导后4小时腹腔内注射和生大黄O．~25ml／g，模型诱导前2小 腹膜广泛的坏死性感染成为影 响重症 急性胰腺炎 (8evei~ 时和模型诱导后 6小时灌胃；Dig和DH8组生大黄 0．025ml／ acutepancreafifis，SAP)生存的主要因素，而这种感染是肠源性 g模型诱导前 2小时和模型诱导后 6小时灌 胃，SAP9和 的 0]。近年国外的研究发现，肠道不仅存在获得性免疫屏 SAP,。组生理盐水等量同时间腹腔内注射和灌胃。 组不做 障，同样也存在天然免疫屏障，内源性的抗菌肽就是小肠天 任何处理。 然免疫屏障的组成部分。隐凹素 一4(eryr~li,,一4)是由小肠 1．3 标本采集 处死小 鼠心脏采血，检测淀粉酶。观察腹 潘氏细胞 (panetllcells)分泌的一种抗菌肽，具有广谱和强大 腔脏器的变化，完整切除胰腺 ，用 10％的甲醛溶液固定胰腺 的抗微生物活性，尤其是抗条件致病菌感染的关键因子3J。 标本 ，送病理检查。取回肠末端 100—120mg组织、切开、4℃ 本实验应用生大黄、丹参注射液对 ICR小鼠实验性急性胰腺 盐水漂洗 3次、滤纸吸干、一80℃冻存。 炎发病过程进行干预，通过对隐凹素一4mRNA表达影响的 1．4 隐凹素 一4mRNA检测 RT—PER技术。 研究，进一步阐明大黄和丹参治疗急性胰腺炎的作用机制。 1．5 统计学处理 各组取均数后，应用 SPSS软件 11．5版进 1 材料和方法 行方差分析。 1．1 实验动物、分组和试剂 ICR小鼠70只，雄性，体重 (23 2 结果 ±1．5)g，购 自浙江省实验动物中心。随机分为7组 (n： 2．1 一般情况 小鼠造模后，觅食活动明显减少，喜群挤， 1O)：SD(对照组)；SAP一9Il(9小时模型组)、SAP_l8(18小时模 皮毛稍疏松，腹部膨隆，尿量增多。大体观：模型组肠管扩 型组)；DH9Il(9小时大黄组)、DH h(18小时大黄组)；DD一讣 张，网膜组织和肾脂肪囊可见皂化斑，腹腔 内有黄色或淡血 (9小时大黄丹参组)、DD一，踮(18小时大黄丹参组)。雨蛙素 性渗出液 ，胰腺水肿，符合急性胰腺炎的病理改变。组织学： (caerulein，Cn)：购 自Sigma公司；内毒素(LPS)：购 自Sigma公 胰腺间质水肿 ，粒细胞浸润，少量红细胞，无腺泡坏死。各中 司；丹参注射液：青春宝药业；生大黄水煎剂 (1ml／lg)：自制； 药治疗组病理损害减轻。 RNA提取试剂盒 (％ Reagent)：购 自GibcoBRL公司；RT— 2．2 各组小鼠小肠隐凹素一4m