钙调神经磷酸酶及GATA-6在大鼠主动脉钙化中的作用.pdfVIP

第31卷第 1期 河 北 医 科 大 学 学 报 Vo1．30 No．1 · 74 · 2010年 1月 JOURNALOFHEBEIMEDICALUNIVERSITY Jan． 2010 · 论 著 · 钙调神经磷酸酶及 GATA一6在大鼠主动脉 钙化中的作用 陈 丽，李绍冰 ，苑晓烨，王至尊，郑 敬 (河北省人民医院老年心血管病 区，河北 石家庄 050051) 【摘要】 目的 观察钙调神经磷酸酶 (calcineurin，CaN)和锌指转录 因子 6 (zincfingerGATAtranscription-6， GATA一6)在大鼠主动脉钙化 中的作用 。方法 用华法令和维生素 D。建立大鼠血管钙化模型，4周龄雄性 SD大 鼠 36只随机分成对照组 ，钙化组和钙化+环孢霉素 A(cyclosporinA，CsA)组 。HE染色及 电镜下观察血管结构变 化 ；原位杂交方法检测各组 GATA一6mRNA及 CaNAamRNA的表达 ；免疫组织化学方法检测各组 GATA一6及 CaNB1蛋 白表达 ，测定主动脉组织 CaN 活性和碱性磷酸酶活性 。结果 钙化组和 CsA组 GATA_6mRNA、蛋 白及 CaNAamRNA、CaNB1蛋 白的表达增加 (Pd0．01)，钙化组和CsA组 CaN活性及 ALP活性增加 (PdO．01)。结 论 CaN和 GATA一6参与血管钙化调节 ，CsA可能促进血管钙化 。 【关键词】 胆骨化醇 ；钙调神经磷酸酶 ；大 鼠 doi：10．3969／i．issn．1007—3205．2010．O1．029 【中图分类号】 R543．5 【文献标识码】 B 【文章编号1 1007—3205(2010)01—0074—04 动脉钙化在组织病理学上分为动脉 内膜和动脉 CaN及 GATA一6mRNA及蛋白在血管钙化中的作 中层钙化，无论哪种钙化 ，都会引起血流动力学和机 用 。 械力学的改变，最终将导致左室肥大、心肌缺血和心 1 材 料 与 方 法 律失常，并增加脑卒中和猝死的危险。锌指转录因 子一6(zincfingerGATA transcription-6，GATA一6) 1．1 实验材料 ：实验采用 4周龄 SD雄性大 鼠36 是锌指转录因子 GATA一4／5／6家族 中惟一在血管 只，体质量8O～90g，购 自河北医科大学实验动物中 平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells，VSMCs) 心 ，动物合格证编号 604096。华法令粉和维生素D。 表达的转录因子 ，并且在血管损伤 中GATA-6是调 购 自Sigma公司；环孢霉素 A 购 自Novartis公司； 节 VSMCs表现型的重要 因子 。钙调神经磷酸酶 维生素 K 为无锡市第七制药有 限公司产品；磷酸 (calcineurin，CaN)是丝／苏氨酸蛋白磷酸酶家族的 二氢钠 、磷酸二氢钾、氯化钠 、氯化钾等化学试剂均 成员，在全身组织广泛分布 ，其活性受 Ca ／钙调素 由北京益利化学有 限公司生产 ；CaN检测试剂盒、 调节，可介导多条信号传导通路 ，通过作用于不同的 碱性磷酸酶检测试剂盒、考马斯亮蓝蛋白定量试剂 底物而产 生不 同的生 物 学作 用。环 孢霉 素 A 盒均购于南京建成生物公司。 (cyclosporinA，CsA)和 FK506是 CaN 的特异性抑 1．2 实验方法 制剂。活 化 T 细 胞 核 因子 (nuclearfactorof 1．2．1 造模及分组 ：将实验动物随机分为 3组 ，每 activatedTcells，NFATs)家族成员是 CaN最重要 组 12只，对照组 、钙化组 、钙化+CsA组 ；实验动