三维无血清条件培养结合抗癌药物分离人骨肉瘤肿瘤干细胞.pdfVIP

实用癌症杂 2-2010年 1月第25卷第 i期 ThePracticalJournalofCancer，Januao2010，Vol25，No．1 ·5 · 三维无血清条件培养结合抗癌药物分离人骨肉瘤肿瘤干细胞 周 松 李 锋 肖 骏 熊 伟 方 忠 陈文坚 牛鹏彦 【摘要】 目的 探讨无血清三维条件培养结合抗癌药物分离及鉴定人骨肉瘤肿瘤干细胞的可行性。方法 将来 源于人体的骨肉瘤细胞种植于 1．2％藻酸盐凝胶中，并置于添加有阿霉素(Epirubicin，0．8 g／m1)的无血清DMEM／F12 条件培养基中培养。培养7～l0天后，可见凝胶 内出现 由单细胞增殖形成的单克隆球。取出该单克隆球，并通过细胞免 疫荧光(0ct3／4和Nanog)、体 内致瘤实验，检测该单克隆球细胞的生物特性。结果 单克隆球主要 由0ct3／4和Nanog阳 性细胞组成，这些阳性细胞具有明显的致瘤作用：结论 分离所得的单克隆细胞既能表达部分干细胞基因(0ct3／4和 Nanog)，又表现出明显的抗肿瘤药物性和体 内致瘤性，三维无血清条件培养结合抗癌药物分离所得的单克隆骨肉瘤细胞 可能为人骨 肉瘤干细胞 【关键词】 三