3.24深低温冻存对大月龄胎儿带瓣血管材料免疫原性影响.pdf

深低温冻存对大月龄JI．％JL带瓣血管材料免疫原性的影响 摘 要 目的：通过研究深低温保存前后大月龄胎儿主、肺动脉带瓣血管组 织相容性白细胞抗原(HLA)的表达情况，了解HLA抗原的表达位置以 及深低温保存过程对HLA抗原表达的影响。 方法：取脑死亡胎儿(胎龄28周以上)主、赫动脉带瓣照管loft《，热 缺血时间要求在12小时之内。每例标本分成两部分，一部分新鲜者作为 对照组；另一部分为实验组经M199原液与二甲基亚砜(DMSO)处理后浸入 液氮中深低温冻存。所有标本用椿冻韬片包鬈裁(ZLI一9302)敖在不 锈钢包埋模其上快速冷冻。它们被储存在一20℃冰箱，然爱罔恒冷籀切 cM 片机(Leica1900)切片。所有切片包在银箔中储存在一20℃冰箱中 直到被染色，用免疫组化的方法利用鼠抗人单克隆抗体： 55)，CD34(ZM一0046)， 检测冷冻蓠愿人组织捆容性宣细胞撬原l类(1[LAABC)、II类(HLA DR，DP，DQ)和内皮细胞的变化情况，并将检测结果作图像分析。 结果：新鲜的1缸管壁和瓣膜内皮表面均表达I粪抗原(H+)一 (++++)，丽{I类抗原在趣管壁阿皮下层和瓣膜基震中表达。低温冻存 复涅屡：l类抗原在血管壁和瓣膜表皮表露淡失(一)。ll类抗原袭动踩 内皮下层和瓣膜基质中表达减弱(+一)一(+)。动脉内皮下层和瓣膜基 矮中存在CD45摭原染色的纲胞，露这些细胞的表达情况与I{类抗原是相 似的，这些细胞可能是白细胞、巨噬细胞和组织细胞。血管内皮细胞在 深低温冻存前后均强表达(++++)。瓣膜内皮细胞在冷冻后消失(一)， 可麓是瓣貘雨皮细藏层较菲薄、脆弱，程灭菌、冷冻禚复温鲶过程中破 坏了蒸薄的内皮单纲腿层。 结论：深低温冻存后大月龄胎儿HVC仍具有免疫原性，但较深低温 冷冻前降低。这种降低可能与内皮细胞的脱失无关。HLA—I类抗原的存 在不依赖表皮绥黢。HLA—l、Il类抗原焱盘管糯瓣膜鳃表达位置不黼。 研究生：徐平(心胸外科学) 指导教师：邢泉生教授 关键词：HLA抗原，同种移植物，胎儿，深低温保存，免疫组织化学 of Theeffect fetus cryopreservation late—pregnancy homograft valvedconduit immunogenicity ABSTRACT HLA was to the undertaken on o掰ective：Thepresentstudy analysis alloantigen expression cardiac evaluatetheeffectof on ofthe homografts．To cryopreservationimmunogenicityhomograf_[s and conduitsandvalvesfrom fetus， ’ aorticpulmonary