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74 食品与药品 FoodandDrug 2010年第 12卷第01期 · 知识介绍 · 玻璃体液多糖 MeyerK.PalmerJW 1 引言 不能发生沉淀,但加入碱式醋酸铅后发生了沉淀 。 M6mer的研究使玻璃体液中存在黏蛋白的观点被 Molish反应呈强阳性。根据分析数据和发生的反应, 广泛接受。M6mer~U备黏蛋白的方法是稀释天然玻璃 此种物质不是黏蛋白,而是一种多糖。 体液后加入稀醋酸沉淀,此后的研究者都用此方法。 为得到纯化的多糖酸,将100只牛眼球的玻璃体 Duke.Elder在其有关玻璃体性质的书中,指出玻璃 液经丙酮沉淀后所得的粉末用200mL90%醋酸提取3 体液黏蛋白浓度为0.021%或约为总蛋白质的30%。 次。残留物用乙醇清洗直至除去大部分醋酸,然后混 M6mer分析这种黏蛋白的结果显示,N含量12.27%, 悬于水,用1mol/LNaOH中和、离心。离心后的残留 S含量I.19%。 物用水重复提取数次。残留物含有纤维状物质,除热 典型的黏蛋白如卵黏蛋白极易分裂为多糖和蛋白 碱外,在其他溶剂中皆不溶,其氮含量13.5% (无灰 质。因此,Levene和Mori提出卵白与其1O倍体积的1O 分),水解后呈强烈的Molisch反应。此物质性质与 %Ba(OH)共同用蒸汽浴加热7h后定能水解。 胶原相似,可能与Duke—Elder的 “残留蛋白”相同。 为进行其他研究,我们制备了玻璃体液黏蛋白。 其产量为100只牛眼球0.7~1.0g。将上述残留物的水 制备期间用非常温和的方法获得了一种游离的高相对 提取物倒入其6倍体积乙醇中,加入少量冰醋酸,放 分子质量多糖酸,它以类似盐复合物的形式存在于玻 置冷处过夜。将混合物离心,将所得的固体物质溶于 璃体液中。正如一些细菌中存在某些特定多糖一样, 少量水中,倒入其15倍体积的冰醋酸。将所得的黏性 这种多糖酸似乎是高级动物中特有的物质。 物置入冰箱过夜。用乙醇、丙酮和乙醚充分清洗后粉 2 实验与结果 碎,以PO为干燥剂真空干燥至粉末状。100只牛眼 2.1 原料与方法 球的产量约0.73g,即为有机原料的30%。产物中含 原料为新鲜牛眼玻璃体液的丙酮沉淀物 。从屠宰 有的无机物 占2%~10%,其中大部分是CaSO ,可 场获得100只新鲜牛眼球,装于冰块内取回,立即采 通过溶于0.2mol/L盐酸后用冰醋酸重新沉淀除去。用 集玻璃体液,用有孔的棉纱过滤,剧烈搅拌后,将滤 相似的步骤处理卵白,不能获得多糖。 液倒入其l0倍体积的冷丙酮中。置入冰箱过夜后抽 2.2 结果 滤,用丙酮和乙醚充分清洗,以PO为干燥剂真空干 多糖酸制备过程 中测到 的数据 见表 1。为便 燥呈粉末状。100只牛眼球产量约3.2g,含N7%、水 于表述 ,我们建议将该多糖酸命名为 “透 明质酸 分l1%和灰分 (用HSO灰化)40%。所得粉末加水 (hyaluronicacid)”,来源于hyaloid (透明的,玻 获得的混悬液pH10,玻璃体液原料pH约7.8。这种 璃状的)+uronicacid(糖醛酸)。 碱性反应不能用丢失CO:来解释。碳酸氢盐通过相似 这种游离酸具有极强的吸水性,在水中不易溶 的处理并未产生碳酸盐。其他的蛋白质溶液如血清, 解。其盐极易溶解,形成高黏度溶液。以下定性实验 经丙酮沉淀后酸性略有增强。 均呈阳性:糖 (Molisch实验),戊糖 (Bial实验), 第一步实验 中,丙酮沉淀所得粉末的水提取物 戊糖或己糖醛酸 (Tollens间苯三酚实验),己糖醛酸 用酸化乙醇沉淀。获得的粉末含5%~6%的N和 (Tollens间苯二酚实验),氨基糖 (Elson—Morgan反 30%~40%的还原物质如葡萄糖 (密封管中用2mol/L

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