蛹虫草废弃培养基多糖不同脱蛋白方法的比较研究.pdfVIP

· 106· 广州化工 2010年 38卷第 1期 蛹虫草废弃培养基多糖不同脱蛋 白方法的比较研究 孙诗清 (嘉兴学院生物与化学工程学院，浙江 嘉兴 314000) 摘 要 ：研究比较Sevag法、改良的Sevag法和澄清剂法对蛹虫草废弃培养基多糖中杂蛋白去除情况的影响。结果表明：Sevag 法、改良的Scrag法和澄清剂法对蛹虫草废弃培养基多糖中杂蛋白的脱除率分别为：80％、83．2％、91．3％；多糖损失率分别为： 14．3％、18．1％、14．2％。比较这三种去除杂蛋白方法，澄清剂法脱蛋白效果最好 。 关键词 ：蛹虫草；胞外多糖；脱蛋白 ComparisonofDifferentM ethodsforRemovalof Proteinfrom ExopolysaccharideofM ilitarisMedium Abandoned SUN Shi—qing (CollegeofChemicalandBiologicalEngineering，JiaxingUniversity，Zh~iangJiaxing314000，China) Abstract：Threemethods(Sevag，Sevagimproved，Clarifier)ofremovingproteinfromtheex0polysaccharideofrail— itarismedium compared．Theresultsshowedthatthepercentageofremovedproteinforthethreemethodswere80％ ， 83．2％ and91．3％ ，respectively，andthepercentageofdecomposedpolysaccharidewere14．3％ ，18．1％ and14．2％ ， respectively．Itwasconcludedthatthemethodofclarifierremoval ofproteinisaneffectivemethodthroughthecomparison． Keywords：Cordycepsmilitaris；exopolysaccharides；removalofprotein 蛹虫草(CordycepsmilitarisL)作为重要的药食两用产品，富 1．2 实验方法 含虫草多糖、虫草素、腺苷等生物活性物质，具有抗菌、抗肿瘤及 1．2．1 蛹虫草废弃培养基多糖的提取 免疫调节等重要作用…。目前，蛹虫草人工栽培较多，产生了大 称取蛹虫草培养基粉末 lOOg，按照文献 上的最佳工艺条 量的蛹虫草废弃培养基，其中也含有大量的生物活性物质如胞 件提取，提取液减压浓缩至小体积，加入3倍体积 95％乙醇沉 外多糖，是一种能有效激活免疫细胞并对宿主正常细胞没有直 淀，静置，抽滤，收集沉淀物，依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤三 接毒副作用的高效生物效应调节剂，具有重要的应用价值 I3J。 次，真空干燥 ，得蛹虫草废弃培养基多糖EPSI。 本实验研究了蛹虫草废弃培养基多糖不同脱蛋白的方法，分析 l_2．2 蛹虫草废弃培养基多糖脱蛋白 其多糖损失率和蛋白脱除率 ，为蛹虫草胞外多糖的进一步纯化 1．2．2．1 Sevag法脱蛋 白 提供一定的参考。 准确称取EPSI2．140g于锥形瓶中，加水 lOmL，80~C加热溶 解并过滤，去除不溶物，上清液放凉后定容至 10mL，用Sevag法 1 实验部分 除蛋白，脱除4次，离心，收集上清液，透析48h后，再加入 30mL 1．1 材料、仪器与试剂 95％乙醇沉淀，离心，收集沉淀物，依次用