植物（大葱）谷胱甘肽过氧化物酶分离纯化探索.pdfVIP

盛些銮颦主耋垡鲨矗 ． 垫墓 摘要 。 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Mills在牛红细胞中发现的，近年来人们叉在植物中检测到了该酶，它是一种含硒酶。在GSH 作为氢供体的条件下，GSH-Px可清除有机氢过氧化物、细胞呼吸代谢产生的羟自由基和过 氧化物，从而使细胞能维持正常的生理生化功能，故有防止畸变、预防衰老及参与前列腺素 合成等重要病理或生理作用，并引起了人{f】的关注。已有不少从人、动物、微生物体中分离 纯化出GSH．Px的报道，而从植物体中分离纯化GSH．Px的报道却极少。如果能从自然界丰 富的植物资源中寻找到多种来源的GSH-Px，并分离纯化，将为该酶的开发研究和应用提供 新的资源和途径。 采用测定GSH-Px的间接法II检测了大葱、蒜、洋葱、姜、银杏老叶和新叶以及草珊瑚中 的酶活性。其中太葱中GSH—Px活性最高，且大葱较易获得，不受季节限制，所以本实验选择 了大葱作为GSH-Px分离纯化的材料。 和提纯倍数随(NH4)2S04饱和度的增大而增加，在30％～50％饱和度范围内增加较快，在50 ％～80％饱和度范围内增加较为缓慢，在80％～100％饱和度范围内开始逐渐。F降i。但仍较大， 酶，即GSH．PxI和GSH-PxII。大葱租提液比活力为15．42 U／rag，经(NH|bS04盐析后比活 力为26．46 U／mg，纯化倍数为1．72；GSH-Px 65U／mg，纯化 U／mg，纯化倍数为2．73：GSH-PxII经DEAE·Sepharose柱层析后比活力为66 倍数为4．32。 力逐渐增大，囚丽反应速度也加快；当温度达到一定跟度时(45C以上)。温度升嘉虽然能使 酶促反应速度加快，但是，过高的温度也加速TGSH．Px的酶蛋白变性，酶失活。结果是随着 温度的升高，反应速度反而下降，即50℃～60℃温度范围内，GSH-Px酶活力迅速降低。 口H高于8．0均会使酶分子结构发生变化，酶活性降低。 随着贮存时间的延长，各种温度条件下酶活力都有下降，在室温和4C下贮存，酶活性下降较 多，特射是一周后酶活力就有显著的变化：而在-20C和舶℃下贮存，酶活力虽然有所降低， 但变化较小。 CuS04对GSH．Px有抑制作用。 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶 分离纯化探索 II 量醴盔耋鎏圭耋丝鎏銮 垫茎 Abstract Glutathione or a Peroxidase(GSH-PxGPX)is whichwasfirst selenium-dependentenzyme discoveredincattle wasdiscoveredin GSH erythrocyteby offers Mills，recently plants．If hydrogen， GSH-PxcouldweedOUt fromcellular membolismand ROOH、H202 respiration hydrogen the cellcouldmaintainthenormal madbiochemical peroxidase．So physiolo