天蚕素A-爪蟾素2杂合肽P18对MDA-MB-435s乳腺癌细胞的作用研究.pdfVIP

四川动物 2010年 第 29卷 第 1期 SichuanJourn~ofZoology Vo1．29 No．1 2010 天蚕素A-爪蟾素 2杂合肽 P18对 MDA—MB-435s 乳腺癌细胞的作用研究 孙彬斌 ，赵晓军 (1．四川大学纳米生物医学技术与膜生物学研究所，成都610041；2．CenterofBiomedicalEngineering，NE47-379， MassachusettsInstituteofTechnology，Cambridge，MA02139-4307) 摘要：目的 研究天蚕素A一爪蟾素2杂合肽 P18对体外培养的人类乳腺癌细胞株MDA—MB435s的活性作用。 方法 采用MTF法检测P18对体外培养的MDA—MB-435s细胞增殖的影响；使用 Live／DeadViability／Cytotoxicity试 剂盒对细胞进行染色，并在荧光显微镜下观察细胞的存活状态；通过 DiBAC (3)染色，以荧光分光光度计检测给肽 时细胞膜的膜 电位变化 ；在透射 电子显微镜下观察 P18作用 24h后细胞超微结构的变化。结果 M1Tr试验表明 P18对MDA—MB435s细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用；荧光显微镜下可观察到P18可以使MDA—MB-435s细 胞膜破损，细胞死亡 ；P18作用时，荧光分光光度计检测到 MDA—MB-435s的细胞膜发生了去极化现象；透射 电子显 微镜下可见大量细胞崩解坏死。结论 杂合肽P18能够引起MDA—MB-435s细胞膜的通透性改变而导致细胞坏死。 关键词：P18；天蚕素A；爪蟾素2；乳腺癌细胞 MDA—MB-435s；细胞膜通透性 中图分类号：R979．1 文献标识码：A 文章编号：1000—7083(2010)Ol一0041—04 TheEffectofCecropinA—M againin2HybridAntimicrobialPeptideP18 on the M DA．M B-435sCellLine SUNBin—bin，ZHAOXiao-jun， (1．InstituteforNanobiomedicalTechnoloyg andMembraneBioloyg ，SichuanUniversity，Chengdu610041，China； 2．CenterofBiomedicalEngineering，NFA7—379，MassachusettsInstituteofTechnoloyg，Cambridge，MA02139-4307) Abstract：Objective TostudytheeffectofcecropinA—magainin2hybridantimicrobialpeptideP18onthehumanbreast cancercelllineMDA—MB-435s．M ethods CulturedMDA—MB-435scellsweretreatedbyP18andcellproliferationwasas— sessedbvMrTassay：thestateofthecellswasobservedwithaLive／DeadViability／Cytotoxicitykitbyfluorescencemicros— copy；thechangeofcellmembranepotentialwasmonitoredwiththeexistenceofDiBAC4(3)byspectmnu0mmeter；andthe uhrastructureofMDA—MB435sceilswereobservedbytransmissionelectronmicroscopyafter24hourP18treatment．Re- suits MTrtestshowsthatP18caninhabittheproliferationofMDA—MB-435s