甘蓝型油菜及白菜与荠菜杂种及后代的遗传学与研究.pdfVIP

甘蓝型油菜及白菜与荠菜杂种及后代的遗传学研究 王华 摘要 油菜是我国的主要食用油来源和重要的饲用蛋白质来源，同时也是重要的能源 作物，在国民经济中起着重要的作用。但是我国的低芥酸和低硫甙资源均是从国外 引进的，并且低芥酸资源均是来自德国的地方品种Liho，低硫甙资源是来自波兰的 地方品种Bronowsk，遗传基础十分单一。并且油菜菌核病是我国油菜等油料作物生 产的主要限制因子之一，尤以长江流域和东南沿海的冬油菜区发生最重，目前世界 上还未找到抗菌核病的抗原材料。而荠菜(Capsella 十字花科独行菜族荠菜属，一、二年生植物，是一种常见的中药，其种子为天然的 双低资源(芥酸0．胡％，硫甙15．鹋％)，并且还是一种抗菌核病资源。因此，本研 究主要是通过甘蓝型油菜及白菜与荠菜的远缘杂交途径创建具有双低(低芥酸、低 硫甙)、抗菌核病的新材料或中间材料，并对创建的甘蓝型油菜及白菜与荠菜族间 杂种一代及其后代进行普通细胞学、扩增片断长度多态性(Amplifiedfragmentlength s／tu polymorphism,AFLP)及基因组原位杂交分析(Genomic／n 主要结果如下： 1．杂种的获得及形态特征。以甘蓝型油菜品种中油821和华双三号及白菜品 种矮脚黄为母本，以荠菜为父本，配制杂交组合，一部分通过幼胚进行胚挽救，获 得32株中油821与荠菜杂种一代再生植株、30株华双三号与荠菜杂种一代再生植 株和63株矮脚黄与荠菜F1再生植株，另外一部分通过直接收种子获得1株华双三 号与荠菜F1再生植株。从总体上看，其Fl植株在形态上与母本相似，但甘蓝型油 菜与荠菜杂种植株其中有三株表现出叶片颜色变深，基部叶片缺刻变深，形似荠菜； 茎杆木质化；在发育过程中出现紫色茎杆和角果，但在发育后期转为绿色。而白菜 与荠菜的杂种植株中有三株植株表现出基生叶丛生，莲座状；基部分枝；叶片比矮 脚黄颜色变深，变小。 2．杂种的普通细胞学及基因组原位杂交分析。甘蓝型油菜与荠菜的杂种一代 根据子房染色体数目和花粉母细胞(PMCs)减数分裂染色体的配对分离情况将其 体桥较为普遍。第二类植株染色体数2n=38，其配对方式为19lI，分离方式为19： 甘蓝型油菜及白菜与荠菜杂种及后代的遗传学研究 王华 19。白菜与荠菜杂种一代植株染色体数均为20条，花粉母细胞在终变期和中期I 分离方式。以荠菜DNA为探针的GISH方法分析了甘蓝型油菜与荠菜杂种Fl植株 花粉母细胞的染色体组成，没有发现荠菜完整的染色体或染色体片断。 3．AFLP指纹分析。随机选取14对引物对甘蓝型油菜与荠菜杂种一代的基因组 DNA进行扩增，所有的Fl植株能够扩出绝大多数的母本带，荠菜特异带占该单株 的总带数的百分比在0．22—8．37％之间，双亲没有的新增带占该单株的总带数的百 分比在1．17—4．67％之间，而母本缺失带在1．17—3．50％之间。 4．杂种后代的细胞学分析。对甘蓝型油菜与荠菜杂种一代的回交后代中发现 花粉母细胞中染色体形成10个二价体和2个单价体及11个二价体，所以在2n=22 的植株细胞中A基因组是完整的，说明甘蓝型油菜与荠菜的混倍体杂种(2n=25-- 29)植株中被丢失的染色体大多可能来自C基因组。而在白菜与荠菜杂种自交一代 为主，也说明白菜与荠菜杂种(2n=20)植株中A基因组相对稳定，没有被丢失的 倾向。 最后，我们推测合子细胞在发育过程中经历了染色体加倍与双亲染色体组的部 分或完全分开及父本染色体的倾向性消除。荠菜染色体在消除的过程中亦可能与其 他基因组的染色体发生交换和重组导致其遗传物质渗入。外源遗传物质的进入导致 受体基因组结构及基因表达的改变，例如AFLP分析时有新带型的出现等。 关键词：远缘杂交；染色体消除；遗传渗入；基因组原位杂交；扩增片断长度多态 性 Ⅱ 甘蓝型油菜及白菜与荠菜杂种及后代的遗传学研究 王华 Abstract The whichisthemain rapeseed sourceofedible and