杂色曲霉素暴露对机体免疫调节细胞的影响及可能机制研究.pdf

中文摘要 杂色曲霉素暴露对机体免疫调节细胞的影响及其可能机制 的研究 摘 要 种具有致癌性的代谢产物。杂色曲霉素产生菌及ST在世界各地粮食及饲 料中的污染比较普遍，甚至在潮湿居所的地毯中也检出了ST的污染。研 究表明，饲喂含有ST的饲料或灌喂ST均可诱发实验动物肺腺癌的发生。 ST可以诱发体外培养人胚胃粘膜细胞的恶性转化。除致癌作用外，ST对 免疫细胞的增殖、凋亡、细胞因子分泌、抗原递呈等均有一定影响。 免疫系统是机体抵御外界因素侵害的重要屏障，许多致病因素可通过 削弱甚至摧毁机体的免疫功能而致病。某些致癌因素也可通过直接和间接 作用造成机体免疫细胞改变，特别是免疫监视机能的改变而发挥致癌作 用。目前有关ST诱发免疫损伤的机制研究多集中在淋巴细胞细胞的增殖、 凋亡、细胞因子分泌等直接的免疫反应方面，对免疫调节细胞的研究甚少。 因此，在整体水平和细胞水平上探讨给予ST作用对机体免疫调节功能的 影响及其机制对进一步揭示ST的致癌机理和其它生物效应具有一定学术 意义。 调节性T淋巴细胞是机体免疫系统的重要组成部分，在防止自身免 疫，保持机体的自身耐受性中发挥着决定性作用，但同时也具有减弱机体 对肿瘤和感染免疫反应的作用。FoxP3阳性表达是鉴定调节性T淋巴细胞 的重要标志。树突状细胞(DCs)是机体免疫系统中一种重要的抗原递呈细 效应；诱导或调节初级或次级免疫反应。浆细胞样树突状细胞(pDCs)是树 突状细胞家族中的成员之一，在慢性炎症及自身免疫性疾病的发生发展中 转导途径的关键蛋白，在体内参与了多种淋巴细胞的激活；皮肤T细胞 变化与多种皮肤疾病的发生发展有关。 迄今为止，文献中尚未见有关ST对调节性T淋巴细胞和浆细胞样树 中文摘要 体免疫调节功能的影响及其可能机制，本研究在前期实验研究的基础上， 在整体水平上观察了ST急性作用对BALB／c小鼠外周血、胸腺、脾脏和 皮肤中FoxP3+调节性T淋巴细胞和CD1 的影响，以及小鼠皮肤中CaN和Ccl27表达变化；在细胞水平上研究了 ST急性作用对人外周血单个核细胞中FoxP3+调节性T淋巴细胞的影响， 的作用。 本研究论文共分为三个部分： l杂色曲霉素对BALB／c小鼠外周血及免疫器官中免疫调节细胞的影响研 究 目的：探讨腹腔注射ST对BALB／c小鼠外周血单个核细胞及免疫器 官中FoxP3+调节性T淋巴细胞和浆细胞样树突状细胞的影响。 次性给予雄性BALB／c小鼠ST处理，眼球放血收集小鼠外周静脉全血， 采用聚蔗糖．泛影葡胺密度梯度离心法分离小鼠外周静脉血单个核细胞； 处死小鼠，胸腺、脾脏组织完整取材。采用FCM检测小鼠外周血单个核 CDl23和BDCA2在蛋白和mRNA水平的影响。 结果： 1．1 响 FCM检测结果显示，ST处理24h，与溶剂对照组相比，不同剂量S1 (r=0．862，n=5，PO．0 1)。 RT-PCR检测结果表明，给予ST作用24h后，与溶剂对照组相比， 小鼠外周血单个核细胞FoxP3 浓度有明显剂量依赖关系(1-=0．944，n=5，P0．01)。 中文摘要 1．2ST对小鼠胸腺和脾脏内FoxP3+T淋巴细胞的影响 FCM检测结果显示，ST处理24h，与溶剂对照组相比，不同剂量ST #g／kg 衅O．05)。而300#g／kg和3000#g／kg T淋巴细胞百分率均无明显变化。但各不同剂量ST处理均可明显提高胸 FoxP3+T淋巴细胞百分率呈逐渐增高的趋势欧0．05)。 免疫组化结果显示，ST 腺内淋巴细胞FoxP3+T淋巴细胞标记指数明显高于相应溶剂对照组 ST浓度范围内，胸腺和脾脏 相应溶剂对照组(氏O．05)。在0，一--3000#g／kg 1， n=5，P0．01；脾：r=0．873，n=5，P0．01)。