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# 6 # ( 134) 2004 3 16 3
单味中药对成骨相关基因表达的影响1
上海市伤骨科研究所( 200025)
2
为比较常用接骨单味中药对体外培养成骨细胞成骨相关基因 达的影响应用RT-PCR 方法观察常用接骨单味中药含药
血清对体外培养成骨细胞成骨相关基因mRNA 的 达结果显示单味中药在促进成骨细胞中cbfal 的 达以自然铜为最, 其下
依次为续断当归乳香没药和地鳖虫, 而骨碎补并没有促进 cbfal 的 达;在促进成骨细胞 BMP-2 的 达中以续断和骨碎补为
最,依次为当归自然铜和没药,但是地鳖虫和乳香并没有促进 BMP-2 达的功能; 在促进IGF 的 达中, 以乳香为最, 依次当归
自然铜续断, 而骨碎补地鳖虫和没药, 却没有上调IGF 的 达 明单味接骨中药可影响成骨相关基因的 达, 但不同药物作
用的基因靶点不同
/ /
: R322.7 1; R329. 2 8 :A : 1001-6015(2004) 03-0006-03
, 5min ,4 e 12000r 15min, , 1.5
, ml ; » 0. 5ml, , 22e 5min , 4e
, 12000r 15min, ; ¼ 1ml75% , 4e 12000r
7 5min, , , 25ulDEPC ,-80e
,
122
1 1. 6 RNA 1ml DEPC ,
1. 1 Trizol LS reagent ( GIBICO BRL) Rnasin(promega) 1ml DEPC 5ul , 260nm280nm
random primer( promega) MMLV ( GIBICO) dNTP( promega) OD , RNA OD ,
TaqDNA(PE) PCR marker( ) D-Hanks ( GIB- 1. 80~ 2. 0
CO) DMEM (Gibco) ( Promega) 1. 7 RT-PCR
( ) DEPC( ) 1. 7. 1 总RNA 逆转录cDNA 20Ll, 1ugRNA
RNAsinrandom primer5@ bufferdNTPMMLV, dH O
1.2 ( CSB-1) (Heraeus 2
B-5060 EK-CO ) GeneAMP PCR system 2400(Applied Biosystems) 20ul, ( 65e 5min, ; Rnasin
2
112 MMLV 37 e 60min, 95e 5min, -20 e , PCR
1.3 SD , 4 ,
250~ 350mg )
( ) ( )
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